Гистологийн техник. Микроскопийн арга, техник

Бүхэл бүтэн нийгмийн амьдралд шинжлэх ухааны ач холбогдлыг үгүйсгэхэд маш хэцүү байдаг. Эрдэмтэд болон тэдний хөгжил нь нийгэмд одоо ашиглаж, баяр баясгалантай байгаа бүх зүйлийг өгсөн. Төрөл бүрийн салбар дахь эрдэмтдийн хөгжил нь үхлийн аюултай өвчнийг даван туулах, сэтгэцийн эмгэгтэй тэмцэх, өвөрмөц "ухаалаг" тоног төхөөрөмж, тэр ч байтугай роботуудыг бий болгох боломжийг олгодог. Шинжлэх ухааны боломжууд үнэхээр хязгааргүй юм. Шинэ нүүр царай үргэлж шинэ санааг авчирдаг бөгөөд энэ нь ирээдүйн хөгжлийн үндэс болдог. Гэсэн хэдий ч олон хөгжүүлэлт нь энгийн бөгөөд батлагдсан аргууд дээр суурилдаг.

Өнгөрсөн үеийн олон мэргэд макро болон бичил ертөнц байдаг гэж хэлсэн байдаг. Хөгжлийн тэр үе шатанд хүмүүс эдгээр үгсийн гүнийг бүрэн ойлгож чадахгүй байв. Эцсийн эцэст макро болон бичил ертөнцүүд үнэхээр оршдог бөгөөд хоорондоо маш нягт холбоотой байдаг. Эсийн бүтцэд бага зэргийн өөрчлөлт гарч болно дэлхийн өөрчлөлтүүдВ нарны систем. Өнөөдөр ийм харилцааг батлах эсвэл үгүйсгэх нь маш хэцүү боловч бактери, эсийн ертөнцийг судлах нь эс бол жижиг ертөнц гэдгийг харуулж байна.

Микроскопи

Микроскопи бол микроскоп ашиглах шинжлэх ухаан юм. Грек хэлнээс орчуулсан энэ үг нь "жижиг, жижиг" гэсэн утгатай. Микроскопийг хэд хэдэн дэд төрөлд хувааж болно: оптик, мультифотон, рентген, лазер, электрон. Энэхүү судалгааны аргын зорилго нь объектын ажиглалтыг нэмэгдүүлэх, анзаарагдсан өөрчлөлтийг бүртгэх явдал юм.

Микроскопын түүх

Түүний эхэнд түүхэн хөгжилмикроскопууд нь харагдахуйц гэрлийн цацрагийг ашигладаг байсан. Ийм багаж нь ажиглалт хийхэд маш сул байсан бөгөөд зөвхөн энгийн үйлдлүүдэд тохиромжтой байв. Эрдэмтэд үүнийг солих талаар бодож байх үед электрон микроскопын санаа гарч ирэв цахилгаан соронзон цацрагэлектрон цацраг руу. Энэ үйл явдал нь объектыг ажиглах боломжийг ихээхэн өргөжүүлсэн электрон микроскопын хөгжлийг тэмдэглэв.

Микроскопийн аргууд

Аливаа объектыг зөв, нарийн шалгахын тулд тодорхой алгоритмын дагуу ажиллах шаардлагатай байдаг. Ийм алгоритмыг нэг удаа боловсруулж, олон жилийн турш ашигладаг. Суралцахын тулд бидний эргэн тойрон дахь ертөнцтусгай тоног төхөөрөмж ашиглан тусгай аргыг эзэмших шаардлагатай. Микроскопийн аргууд нь янз бүрийн алгоритмуудын багц бөгөөд үүний дараа та бичил ертөнцийн тодорхой объектыг сайтар, системтэйгээр судлах боломжтой. Микроскопоор гэрлийн цацрагийг нэвтрүүлэх нь анхны шинж чанарын зарим өөрчлөлтийг дагалддаг. бүтцийн бүтэцсэдэв. Энэ процесс нь тусгал, шингээлт, хугарал, тархалт гэх мэт олон тооны оптик эффектүүд дагалдаж болно.

Гэрлийн микроскопийн аргууд

Гэрлийн микроскоп нь үр дүнг найдвартай харуулахын тулд янз бүрийн оптик эффектүүдийг ашигладаг техникийн систем юм. Үзэгдэх элементүүд болон үүссэн зургийн шинж чанар нь гэрэлтүүлгээс ихээхэн хамаарна. Нийтдээ байдаг их тоомикроскопийн аргууд: тод талбар, ташуу гэрэлтүүлэг, хөндлөнгийн тодосгогч, харанхуй талбар, туйлшралын арга, фазын тодосгогч, хэт ягаан, флюресцент, хэт улаан туяаны микроскоп, конфокаль микроскоп.

Эдгээр бүх аргууд нь тодорхой давуу болон сул талуудтай байдаг. Түүвэртэй ажиллахдаа тухайн нөхцөл байдалд тохирохуйц дээр үндэслэн нэг буюу өөр аргыг сонгох хэрэгтэй. Хүчтэй ба сул талуудАрга тус бүр нь ерөнхийдөө чухал биш бөгөөд гол зүйл бол тухайн аргыг тухайн нөхцөлд ашиглах боломжтой байх явдал юм.

Микроскопи ба эм

Анагаах ухаанд микроскопийн хэрэглээ асар их боломжтой. Өнөөдөр микроскопийн ачаар эрүүл мэндийн байдлыг үнэн зөв тодорхойлохын тулд хүний ​​биеийн янз бүрийн эсийг судлах боломжтой болсон. Биеийн эсүүд хамгийн үнэн зөв, найдвартай үр дүнг өгдөг бөгөөд энэ нь саяхан болтол олж авах боломжгүй байсан, учир нь микроскопууд бүрэн мэдээлэл өгөх боломжгүй байв.

Ийм төхөөрөмжийг ашиглах нь маш ирээдүйтэй, учир нь эмчилгээ, оношлогооны аргууд нь эрс өөрчлөгдөж, бүрэн шилжиж чаддаг. шинэ түвшин. Микроскоп ашиглан хийсэн судалгаа нь эрт дээр үеэс мэдэгдэж, ашиглагдаж ирсэн боловч шинжлэх ухаан хүнийг эсээр эмчлэх босгон дээр байна. Энэ бол уламжлалт эмчилгээний аргуудаас татгалзаж, эмийг мартах онцгой боломж юм. Эс бол биеийн хамгийн хүчирхэг элемент юм. Эрүүл эсийг шилжүүлэн суулгах нь өвчтэй хүнд ямар ашиг тус авчрах талаар ярих нь утгагүй, учир нь энэ нь ойлгомжтой.

Шээсний шинжилгээ

Шээсний ерөнхий шинжилгээ нь шээсний шинж чанар, түүний физик-химийн найрлагыг судлахад чиглэсэн цогц арга хэмжээ юм. Чухал үзүүлэлтүүд нь өнгө, үнэр, урвал, ил тод байдал, нягтрал, түүнчлэн шээсний янз бүрийн бодисын агууламж юм. Шээсний тунадасны микроскоп нь давс, эсийн элемент, цутгамал байгаа эсэхийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Шээс нь бөөрний үйл ажиллагааны эцсийн бүтээгдэхүүн бөгөөд бие махбод дахь бодисын солилцооны үйл явц, цусны байдлыг маш нарийн тусгаж чаддаг гэдгийг ойлгох хэрэгтэй.

Шээсний тунадасны шинжилгээ

Шээсний микроскоп нь биеийн бүрэн үзлэгийн илүү бүрэн дүр зургийг бий болгох боломжийг олгодог. Мөн т рхэцийг шээсний замын болон бөөрний өвчний ердийн болон ялган оношлоход ихэвчлэн ашигладаг. Эмчилгээний явцад эмчийн оролцооны үр нөлөөг үнэлэхийн тулд шээсний микроскопийг томилж болно. Шээсний шинжилгээ нь бие махбод дахь ус, электролитийн тэнцвэрт байдал, бодисын солилцооны үйл явцад тодорхой буюу болзошгүй асуудлуудыг тодорхойлох боломжийг олгодог. Шээсний шинжилгээ нь өвчнийг оношлоход маш үр дүнтэй байдаг ходоод гэдэсний зам, түүнчлэн бие махбод дахь халдварт ба үрэвсэлт үйл явцын үед. Заримдаа шээсний микроскопийг эмнэлгийн болон мэс заслын эмчилгээний үед өвчтөний нөхцөл байдлыг хянахад ашигладаг.

Микроскопоор цусны шинжилгээ хийх

Цусны эсүүд улаан ясны чөмөгт үүсдэг ба дараа нь цусны урсгал руу ордог. Тус бүр нь тодорхой функцийг гүйцэтгэдэг. Лейкоцитууд нь халдвартай эсүүдтэй тэмцэхэд шаардлагатай байдаг, цусны улаан эсүүд нь эсийг хүчилтөрөгчөөр баяжуулж, нүүрстөрөгчийн давхар ислийг зайлуулахад тусалдаг, ялтас нь цус тогтооход маш чухал юм. IN хэвийн нөхцөлХүний бие нь бүх эсийн норматив утгыг боловсруулдаг бөгөөд энэ нь тодорхой хязгаараас хэтрэхгүй. Хэрэв ямар нэгэн хүндрэл, өвчин гарсан тохиолдолд цусны эсүүд хэмжээ, хэлбэр, өнгө, тоог өөрчилж болно. Зөвхөн нарийн микроскопийн шинжилгээгээр эсийн төлөв байдлыг тодорхойлж, зохих дүгнэлтийг гаргаж болно.

Цус бол бүх эсүүдийн хооронд ашигтай бодисын солилцоог хангадаг хүний ​​​​амь өгөгч шингэн юм. Цусны т рхэцийн микроскоп нь микроскопоор хийгддэг судалгаа юм. Судалж буй эмийг нэг дусал цуснаас бэлтгэдэг. Энэ процедурыг цусны ерөнхий шинжилгээ эсвэл лейкоцитын томъёонд багтаасан бөгөөд тусад нь хийдэггүй.

Т рхэцийн микроскоп

Яагаад хэрэгтэй вэ Цусны т рхэцийн микроскопи нь мэргэжилтэнд хүний ​​эрүүл мэндийн байдлын талаар маш чухал мэдлэг өгдөг. Энэхүү шинжилгээг ашиглан цусны улаан эс, ялтас, лейкоцитын тоон харьцаа, тэдгээрийн хэлбэр, хэмжээг тодорхойлох боломжтой. Нэмж дурдахад энэ нь боловсорч гүйцээгүй лейкоцитын тоон илэрхийлэлийг тодорхойлох боломжийг олгодог бөгөөд энэ нь маш чухал юм. чухал цэгхэд хэдэн өвчинд. Мөн цусны түрхэц нь цусны үйл ажиллагааны эмгэг, түүний үүсэх, коагуляци, устгалтай холбоотой өвчнийг чанарын хувьд оношлох боломжийг олгодог. цацраг туяа, хими эмчилгээ хийсний дараа, гемоглобины асуудал, түүнчлэн лейкемийн үед.

Цусны ерөнхий шинжилгээгээр лейкоцит, боловсорч гүйцээгүй эсвэл хэвийн бус эсийн тоон илэрхийлэл нэмэгдэж байгаа бол цусны т рхэцийг тогтооно. Т рхэц авахын тулд та цус эсвэл хялгасан судасны биоматериал ашиглаж болно.

Биологи ба микроскоп

Биологи нь микроскоп ашиглах боломжийг ихээхэн өргөжүүлдэг. Өмнө дурьдсанчлан, цитологи нь орчин үеийн, хүчирхэг микроскопоос ихээхэн хамаардаг. Биологийн микроскоп нь эрдэмтдэд туршилт, судалгаа хийх урьд өмнө байгаагүй өргөн цар хүрээг нээж өгдөг. Орчин үеийн хөгжил нь биднийг ямар ирээдүй хүлээж байгаа талаар одоо ярих боломжийг бидэнд олгож байна.

Биологийн микроскоп нь маш өргөн хэрэглээтэй. Уг төхөөрөмжүүд нь хүний ​​нүдээр харах боломжгүй боловч шинжлэх ухааны туршилт хийхэд маш чухал организмуудыг судлах боломжтой болгодог. Биологийн хувьд хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг арга бол электронуудын чиглэсэн урсгалын улмаас дүрс үүсгэдэг электрон микроскоп юм. Түүнээс гадна гэрлийн микроскоп хүртэл амьд биологийн объектуудыг судлах боломжийг олгодог.

Бараг бүх сортуудыг биологийн судалгаанд ашиглах боломжтой тул микроскопийн аргыг биологид маш идэвхтэй ашигладаг. Интерференцийн микроскоп нь тунгалаг шингэн, объектыг судлахаас гадна чанарын шинжилгээ хийх боломжийг олгодог. Энэ нь төхөөрөмжөөр дамжин өнгөрөх гэрлийн туяа хоёр хуваагддагтай холбоотой юм: түүний нэг хэсэг нь объектоор дамжин өнгөрч, нөгөө хэсэг нь өнгөрдөг. Ийнхүү хоёр цацраг саад болж, нэгдэж, бүрэн дүрсийг бий болгодог.

Төрөл бүрийн хэрэглээний салбарт микроскоп хийх

Микроскопийн хамрах хүрээ маш өргөн. Микроскопууд нь анх биологийн чиглэлээр судалгаа хийхэд зориулагдсан байсан ч өнөөдөр тэдний нөлөөллийн хүрээ ихээхэн өргөжиж байна. Микроскопи гэдэг нь хатуу ба талст биет, гадаргуугийн бүтэц, бүтцийг шинжлэхэд хэрэглэгдэх аргыг олсон цогц аргууд юм. Микроскопыг анагаах ухаанд зөвхөн оношлогоонд төдийгүй бичил мэс заслын үйл ажиллагаа явуулахад идэвхтэй ашигладаг. Түүгээр ч барахгүй эрдэмтэд Европ дахь харь гаригийн амьдралыг хайх зорилготой усан доорх лазер микроскопыг бүтээсэн нь мэдэгдэж байна.

Мөн микроскопгүйгээр төсөөлөхийн аргагүй нано технологийн хурдацтай хөгжлийг мартаж болохгүй. Энэ салбарын хөгжил нь бичил төхөөрөмжүүдийн төрлийг байнга сайжруулж байдаг. Түүгээр ч барахгүй тодорхой орчныг судлах зорилготой шинэ зүйлүүд гарч ирж байна.

Дүгнэж хэлэхэд микроскоп бол жил ирэх тусам илүү идэвхтэй хөгжиж буй ирээдүйтэй салбар гэдгийг хэлэх хэрэгтэй. Хүний үүдэл эсийг сонирхох, түүнчлэн нано технологийн хөгжил нь микроскоп нь аливаа судалгааны ажлын салшгүй хэсэг болж байгааг харуулж байна.

Микроскопыг бичил биетнийг илрүүлэх, судлахад ашигладаг. Гэрлийн микроскоп нь хамгийн багадаа 0.2 микрон хэмжээтэй бичил биетүүдийг (нян, эгэл биетэн гэх мэт), электрон микроскоп нь жижиг бичил биетэн (вирус) болон бактерийн хамгийн жижиг бүтцийг судлах зориулалттай.
Орчин үеийн гэрлийн микроскопуудЭдгээр нь нарийн төвөгтэй оптик хэрэгслүүд бөгөөд тэдгээрийг зохицуулах нь тодорхой мэдлэг, ур чадвар, маш болгоомжтой байхыг шаарддаг.
Гэрлийн микроскопууд нь дизайн, оптик байдлаараа ялгаатай оюутан, ажил, лаборатори, судалгааны гэж хуваагддаг.

Дотоодын микроскопууд (Биолам, Бимам, Микмед) нь аль бүлэгт хамаарахыг харуулсан тэмдэглэгээтэй (S - оюутан, R - ажилчид, L - лаборатори, I - судалгаа), төхөөрөмжийг тоогоор зааж өгсөн болно.
Микроскоп нь механик болон оптик хэсгүүдтэй. TOмеханик хэсэг
(бичил механизм, микро шураг) объектын үе шат эсвэл хоолойн эзэмшигчийг хөдөлгөж байна.
Оптик хэсэгМикроскопыг объектив, нүдний шил, гэрэлтүүлгийн системээр төлөөлдөг бөгөөд энэ нь тайзны доор байрлах Аббе конденсатор, хавтгай ба хонхор талтай толь, түүнчлэн тусдаа эсвэл суурилуулсан гэрэлтүүлэгчээс бүрдэнэ. Линзийг револверт шургуулж, дүрсийг харж буй харгалзах нүдний шилийг хоолойн эсрэг талд суурилуулсан байна. Монкуляр (нэг нүдний шилтэй) ба дуран (хоёр ижил нүдний шилтэй) хоолой байдаг.

Микроскоп ба гэрэлтүүлгийн системийн бүдүүвч диаграм

1. Гэрлийн эх үүсвэр;
2. Цуглуулагч;
3. Цахилдаг талбайн диафрагм;
4. Толин тусгал;
5. Цахилдаг нүхний диафрагм;
6. Конденсатор;
7. Мансууруулах бодис;
7". Бэлдмэлийн томруулсан бодит завсрын зураг, үүсгэсэн: линз;
7"". Сорьцын томруулсан виртуал эцсийн дүрсийг нүдний шилээр харах;
8. Линз;
9. Линзний гаралтын дүрс;
10. Нүдний харааны талбайн диафрагм;
11. Нүдний шил;
12. Нүд.

Зургийг олж авахад гол үүрэг гүйцэтгэдэг линз. Энэ нь объектын томруулсан, бодит, урвуу дүр төрхийг бий болгодог. Дараа нь энэ дүрсийг нүдний шилээр харахад илүү томруулдаг бөгөөд энэ нь ердийн томруулдаг шилтэй адил томруулсан виртуал дүрсийг үүсгэдэг.
ӨсөхМикроскопын ойролцоо томруулалтыг нүдний шилний томруулагчаар үржүүлэх замаар тодорхойлж болно. Гэсэн хэдий ч томруулах нь зургийн чанарыг тодорхойлдоггүй. Зургийн чанар, түүний тод байдал нь тодорхойлогддог микроскопын нарийвчлал, өөрөөр хэлбэл, ойр байрлах хоёр цэгийг тусад нь ялгах чадвар. Нарийвчлалын хязгаар- эдгээр цэгүүд тус тусад нь харагдах хамгийн бага зай нь объектыг гэрэлтүүлж буй гэрлийн долгионы урт, линзний тоон нүхнээс хамаарна. Тоон апертур нь эргээд объективийн өнцгийн нүх ба объектив болон сорьцын урд талын линзний хооронд байрлах орчны хугарлын илтгэгчээс хамаарна. Өнцгийн апертур байнахамгийн их өнцөг

Энд R нь нарийвчлалын хязгаар; - долгионы урт; NA - тоон диафрагм.

Ялгах ашигтайТэгээд ашиггүйнэмэгдүүлэх. Ашигтай томруулалт нь ихэвчлэн 500-1000 дахин томруулсан линзний тоон нүхтэй тэнцүү байдаг. Нүдний томруулалт нь шинэ нарийн ширийн зүйлийг харуулахгүй бөгөөд ямар ч ашиггүй.
Линз ба сорьцын хоорондох орчноос хамааран жижиг ба дунд томруулдаг "хуурай" линз (40 х хүртэл) ба хамгийн их диафрагм ба томруулдаг (90-100 x) дүрэх линз байдаг. "Хуурай" линз нь урд линз ба сорьцын хооронд агаартай линз юм.

Усанд дүрэх линзний нэг онцлог шинж чанар нь ийм линзний урд линз ба бэлдмэлийн хооронд шилний хугарлын илтгэгчтэй ижил (эсвэл үүнтэй ойролцоо) дүрэх шингэнийг байрлуулсан бөгөөд энэ нь тоон нүх, нягтралыг нэмэгдүүлдэг. линз.
**Линз ашиглан олж авсан зураг нь янз бүрийн сул талуудтай: бөмбөрцөг ба өнгөт гажуудал, зургийн талбайн муруйлт гэх мэт. Хэд хэдэн линзээс бүрдсэн линзүүдэд эдгээр дутагдлыг нэг хэмжээгээр засдаг. Эдгээр дутагдлыг засах зэргээс хамааран ахромат линз нь илүү төвөгтэй apochromat линзээс ялгагдана. Үүний дагуу зургийн талбайн муруйлтыг зассан линзийг планхромат ба планапохромат гэж нэрлэдэг. Эдгээр линзийг ашиглах нь бүхэл бүтэн харах талбайг бүхэлд нь хурц тод дүрсийг гаргадаг бол ердийн линзээр авсан зураг нь харах талбайн төв болон ирмэг дээр адил хурц биш юм.
Линзний бүх шинж чанарыг ихэвчлэн хүрээн дээр нь сийлсэн байдаг: өөрийн томруулалт, диафрагм, линзний төрөл (APO - apochromat гэх мэт); Усанд дүрэх линз нь VI тэмдэглэгээтэй ба доод хэсэгт хүрээний эргэн тойронд цагаан цагираг, тосонд дүрэх линз нь MI тэмдэглэгээтэй, хар цагирагтай.
Бүх зорилтууд нь 0.17 мм зузаантай бүрхүүлтэй шилтэй ажиллахад зориулагдсан.
Хавтасны зузаан нь хүчтэй хуурай системтэй ажиллахад зургийн чанарт онцгой нөлөөлдөг (40 x). Усанд живүүлэх объекттой ажиллахдаа та 0.17 мм-ээс их зузаантай халхавч ашиглах боломжгүй, учир нь бүрхүүлийн шилний зузаан нь объектын ажиллах зайнаас их байж болох бөгөөд энэ тохиолдолд объектыг сорьц дээр төвлөрүүлэхийг оролдох үед урд объективийн линз гэмтсэн байж болно.
Нүдний шил нь хоёр линзээс бүрдэх ба хэд хэдэн төрөлтэй бөгөөд тус бүрийг тодорхой төрлийн линзээр ашигладаг бөгөөд энэ нь зургийн согогийг арилгадаг. Нүдний шилний төрөл, томруулагчийг хүрээн дээр тэмдэглэв. Конденсатор нь микроскоп эсвэл гэрэлтүүлэгчийн толины тусгалаар чиглүүлсэн дээж дээр гэрэлтүүлэгчийн гэрлийг төвлөрүүлэх зориулалттай (дээд талын эсвэл суурилуулсан гэрэлтүүлэгч ашиглах тохиолдолд). Конденсаторын нэг хэсэг нь диафрагм бөгөөд энэ нь чухал ач холбогдолтой юмзөв гэрэлтүүлэг
эм.

Гэрэлтүүлгийн хэрэгсэл нь зузаан судалтай бага хүчдэлийн улайсдаг чийдэн, трансформатор, коллекторын линз, талбайн диафрагмаас бүрдэх ба тэдгээрийн нээлхий нь бэлтгэл дээрх гэрэлтүүлгийн талбайн диаметрийг тодорхойлдог. Толин тусгал нь гэрэлтүүлэгчээс конденсатор руу гэрлийг чиглүүлдэг.

Зургийн чанар нь зөв гэрэлтүүлгээс ихээхэн хамаардаг. Хэд хэдэн бий янз бүрийн аргаармикроскопийн үед сорьцыг гэрэлтүүлэх. Хамгийн түгээмэл арга бол Kohler гэрэлтүүлгийн суурилуулалт, энэ нь дараах байдалтай байна.
1) микроскопын толины эсрэг гэрэлтүүлэгч суурилуулах;
2) гэрэлтүүлэгчийн чийдэнг асааж, гэрлийг микроскопын хавтгай (!) толин тусгал руу чиглүүлэх;
3) бэлдмэлийг микроскопын шатанд байрлуулах;
4) микроскопын толин тусгалыг цагаан цаасаар бүрхэж, түүн дээр чийдэнгийн судлын дүрсийг төвлөрүүлж, гэрэлтүүлэгч дэх чийдэнгийн залгуурыг хөдөлгөх;
5) толин тусгалаас цаасыг зайлуулах;
6) конденсаторын диафрагмыг хаах. Толин тусгалыг хөдөлгөж, чийдэнгийн залгуурыг бага зэрэг хөдөлгөснөөр судлын дүрс нь диафрагмын диафрагм дээр төвлөрдөг. Микроскопоос гэрэлтүүлэгчийн зай нь чийдэнгийн судлын дүрс нь конденсаторын диафрагмын диаметртэй тэнцүү байх ёстой (нүдний диафрагмыг суурийн баруун талд байрлуулсан хавтгай толин тусгалыг ашиглан ажиглаж болно. микроскоп).
7) конденсаторын диафрагмыг онгойлгож, гэрэлтүүлэгчийн талбайн диафрагмын нээлхийг багасгаж, чийдэнгийн эрчмийг мэдэгдэхүйц бууруулах;
8) бага томруулж (10x) нүдний шилээр харахад бэлдмэлийн тод дүрсийг олж авна;
9) толин тусгалыг бага зэрэг эргүүлснээр тод толбо шиг харагдах талбайн диафрагмын дүрсийг харах талбайн төв рүү шилжүүлнэ. Конденсаторыг буулгаж, дээшлүүлснээр бэлтгэлийн хавтгайд талбайн диафрагмын ирмэгийн хурц дүрсийг олж авдаг (тэдгээрийн эргэн тойронд өнгөт хүрээ харагдаж болно);
10) гэрэлтүүлэгчийн талбайн диафрагмыг харах талбайн ирмэг хүртэл нээж, чийдэнгийн судлын эрчмийг нэмэгдүүлж, конденсаторын диафрагмын нээлхийг бага зэрэг (1/3-аар) багасгах;
11) Линз солихдоо гэрлийн тохиргоог шалгах хэрэгтэй.
Хөллерийн гэрлийн тохируулга хийж дууссаны дараа та конденсаторын байрлал, талбайн болон диафрагмын нээлхийг өөрчлөх боломжгүй. Эмийн гэрэлтүүлгийг зөвхөн төвийг сахисан шүүлтүүрээр эсвэл реостат ашиглан чийдэнгийн эрчмийг өөрчлөх замаар тохируулж болно.
Конденсаторын диафрагмыг хэт их онгойлгох нь зургийн тодосгогчийг мэдэгдэхүйц бууруулахад хүргэдэг бөгөөд хангалтгүй онгойлгох нь зургийн чанар мэдэгдэхүйц доройтоход хүргэдэг (дифракцийн цагираг үүсэх). Нүхний диафрагмын зөв нээлхийг шалгахын тулд нүдний шилийг салгаж, хоолой руу хараад гэрэлтүүлгийн талбайн гуравны нэгээр нь хамрахаар нээх шаардлагатай.

Бага томруулдаг линзтэй (10x хүртэл) ажиллахдаа загварыг зөв гэрэлтүүлэхийн тулд дээд конденсаторын линзийг тайлж, зайлуулах шаардлагатай.

Анхаар! Өндөр томруулдаг линзтэй ажиллахдаа - хүчтэй хуурай (40x) ба дүрэх (90x) системтэй, урд талын линзийг гэмтээхгүйн тулд анхаарлаа төвлөрүүлэхдээ дараах техникийг ашиглана: хажуу талаас нь харж, линзийг макро шурагаар буулгана. бараг л сорьцтой холбогдох хүртэл дараа нь нүдний шилийг хараад макро шураг ашиглан дүрс гарч ирэх хүртэл линзийг маш удаан өсгөж, микро шураг ашиглан микроскопын эцсийн фокусыг гүйцэтгэнэ.
Микроскопын арчилгаа Микроскоптой ажиллахдаа их хүч хэрэглэж болохгүй.Линз, толь, шүүлтүүрийн гадаргуу дээр хуруугаараа хүрч болохгүй.
Хамгаалах гэж
дотоод гадаргуу линз, түүнчлэн хоолойн призмийг тоосноос авахын тулд та нүдний шилийг үргэлж хоолойд үлдээх ёстой. Линзний гаднах гадаргууг цэвэрлэхдээ эфирээр угаасан зөөлөн сойзоор тоосыг зайлуулах хэрэгтэй. Шаардлагатай бол линзний гадаргууг сайтар угаасан, савангүй, маалинган даавуу эсвэл цэвэр бензин, эфир эсвэл оптик цэвэрлэх зориулалттай тусгай хольцоор бага зэрэг чийгшүүлсэн даавуугаар арчина. Линзний оптикийг ксилолоор арчихыг зөвлөдөггүй, учир нь энэ нь тэдгээрийг салгахад хүргэдэг.Микроскопыг үе үе хүчилгүй вазелинд бага зэрэг дэвтээсэн зөөлөн даавуугаар арчиж, дараа нь хуурай, зөөлөн, цэвэр даавуугаар арчиж байх ёстой.

Уламжлалт гэрлийн микроскопоос гадна толбогүй бичил биетнийг судлах боломжийг олгодог микроскопийн аргууд байдаг. фазын контраст , харанхуй талбайТэгээд гэрэлтдэгмикроскоп. Хэмжээ нь гэрлийн микроскопын нарийвчлалаас бага бичил биетэн, тэдгээрийн бүтцийг судлахын тулд

микробиологийн чиглэлээр: микроскопын дизайн ба амьд бичил биетний микроскоп хийх үндсэн арга

1 Онцлогууд янз бүрийн төрөлмикроскоп

2 Гэрэлт талбайн микроскопын загвар

3 Усанд дүрэх линзтэй ажиллах дүрэм

4 Амьд бичил биетний микроскопийн арга

1 Төрөл бүрийн микроскопийн онцлог

Микроскопийн үндсэн зорилго нь дараах байдалтай байна.

Төрөл бүрийн материал дахь бичил биетнийг илрүүлэх.

Дээж дэх бичил биетнийг ойролцоогоор тодорхойлох.

Бичил биетний зарим морфологийн шинж чанар, бүтцийг судлах (жишээлбэл, капсул, туг гэх мэт).

Колони болон цэвэр өсгөвөрийн будсан түрхэцийг судлах.

Өнөөдөр хамгийн их ашиглагддаг нь гэрлийн микроскоп юм.

Гэрлийн микроскоп 2-3 мянган дахин томруулж, амьд объектын өнгө, хөдөлгөөнт дүрс, бичил хальсанд буулгах, ижил объектыг удаан хугацаанд ажиглах, түүний динамик, химийн байдлыг үнэлэх боломжийг олгодог. Гэрлийн микроскоп дахь дүрс нь объект болон түүний янз бүрийн бүтэц нь янз бүрийн долгионы урттай гэрлийг сонгон шингээдэг (шингээлтийн тодосгогч) эсвэл гэрлийн долгионы үе шат нь объектоор дамжин өнгөрөхөд (фазын тодосгогч) өөрчлөгддөг тул дүрс үүсдэг.

Аливаа микроскопын гол шинж чанар нь нягтрал ба тодосгогч юм. Шийдвэр- Энэ хамгийн бага займикроскопоор тусад нь харуулсан хоёр цэг байдаг. Хамгийн сайн харааны горимд хүний ​​нүдний нарийвчлал 0.2 мм байна. Зургийн тодосгогчнь зураг болон дэвсгэрийн хоорондох тод байдлын ялгаа юм. Хэрэв энэ ялгаа 3-4% -иас бага бол нүд эсвэл гэрэл зургийн хавтангаар илрүүлэх боломжгүй; дараа нь микроскоп түүний нарийн ширийн зүйлийг шийдэж байсан ч зураг үл үзэгдэх болно. Ялгаатай байдал нь арын дэвсгэртэй харьцуулахад гэрлийн урсгалыг өөрчилдөг объектын шинж чанар, мөн цацрагийн шинж чанарын ялгааг олж авах оптикийн чадвар хоёулаа нөлөөлдөг. Гэрлийн микроскопын боломжууд нь гэрлийн долгионы шинж чанараар хязгаарлагддаг. Гэрлийн физик шинж чанарууд - өнгө (долгионы урт), тод байдал (долгионы далайц), үе шат, нягтрал, долгионы тархалтын чиглэл нь объектын шинж чанараас хамааран өөрчлөгддөг. Эдгээр ялгааг орчин үеийн микроскопуудад тодосгогчийг бий болгоход ашигладаг.

Микроскопын томруулалтобъектив томруулалт ба нүдний шилний томруулалтын үржвэр гэж тодорхойлогддог. Ердийн судалгааны микроскопууд 10, 10, 40, 100-ийн объектив томруулдаг. Үүний дагуу ийм микроскопын томруулалт нь 100-аас 1000 хүртэл байдаг Гэсэн хэдий ч нарийвчлал сайжрахгүй байгаа тул утга учиртай. Эсрэгээрээ зургийн чанар мууддаг.

Тоон диафрагмоптик системийн нарийвчлалыг илэрхийлэхэд ашигладаг. Тоон диафрагм нь линзний оптик "хүрэлт" бөгөөд линз рүү орж буй гэрлийн хэмжээг илэрхийлдэг. Линзний тоон нүхийг линзний баррель дээр зааж өгсөн болно. Конденсаторын нүх нь объективийн тоон нүхтэй тохирч байх ёстой. Агаарын хугарлын илтгэгч нь 1 байдаг тул агаартай хиллэдэг аливаа линзний тоон нүхний хэмжээ (жишээ нь, "хуурай систем") 1-ээс хэтрэхгүй байх ёстой. Урд объектив ба линз хоёрын хоорондох орчны хугарлын илтгэгчийг нэмэгдүүлэх замаар тоон нүхийг нэмэгдүүлэх боломжтой. слайдыг шилний хугарлын илтгэгчтэй ойртуулна (1.5). Үүнийг хийхийн тулд объектив линзний урд линз ба судалж буй объектын хооронд агаарын хугарлын илтгэгчээс илүү хугарлын илтгэгч шингэний дусал байрлуулна, жишээлбэл, усны дусал (n = 1.3), глицерин ( n = 1.4) эсвэл хуш (дүрүүлэх) тос (n = 1.5). Дээрх шингэн бүрийн хувьд тусгай линз үйлдвэрлэдэг бөгөөд үүнийг усанд дүрэх линз гэж нэрлэдэг.

Гэрлийн микроскоптогтмол орно дамжуулах микроскоп (тод талбар, харанхуй талбар), фазын тодосгогч, гэрэлтэгч. Сүүлийн үед микроскоп, микроскопийн бусад аргуудыг боловсруулжээ. урвуу байдал Тэгээд төвлөрсөн лазер сканнерийн микроскоп.

Гэрэлт талбайн микроскоп гэрэлт талбарт дамжуулсан гэрлийн объектуудыг шалгах боломжийг танд олгоно. Энэ төрлийн микроскоп нь эсийн морфологи, хэмжээ, тэдгээрийн харьцангуй байрлал, эсийн бүтцийн зохион байгуулалт болон бусад шинж чанарыг судлах зорилготой юм. Гэрлийн микроскоп нь хамгийн дээд тал нь 0.2 микрон нарийвчлалтай бөгөөд энэ нь микроскопыг 1500x хүртэл өндөр нарийвчлалтай өсгөх боломжийг олгодог.

Фазын тодосгогч микроскоп Энэ нь орчинтой ойролцоо хугарлын индекстэй амьд ил тод объектуудыг илүү тодорхой ажиглах боломжийг танд олгоно. Фазын тодосгогч микроскопын ажиллагаа нь фазын шилжилтээс үүдэлтэй (нүдний диафрагмын фазын цагираг ашиглан) зургийн хавтгайд гэрлийн хөндлөнгийн оролцоонд суурилдаг. Фазын тодосгогч микроскопод урвуу оптик бүхий биологийн микроскопыг ихэвчлэн ашигладаг. Ийм микроскопуудад объектууд нь доод талд, конденсатор нь дээд талд байрладаг.

Фазын тодосгогч микроскопийг ашиглан эсийн хэлбэр, хэмжээ, харьцангуй байрлал, тэдгээрийн хөдөлгөөн, нөхөн үржихүй, бичил биетний спорын соёололт гэх мэтийг судалж, микроскопийн энэ аргыг ашигласнаар амьд бичил биетний тодосгогч эрс нэмэгдэж, тодрох болно. тэдгээр нь цайвар дэвсгэр дээр харанхуй (эерэг фазын тодосгогч) эсвэл бараан дэвсгэр дээр цайвар (сөрөг фазын тодосгогч) харагдана.

Харанхуй талбайн микроскоп объектыг ташуу гэрлийн туяагаар гэрэлтүүлэхэд үндэслэсэн. Ийм гэрэлтүүлэгтэй бол туяа нь линз рүү орохгүй тул харах талбар нь харанхуй мэт харагдана. Бэлдмэлийн ийм гэрэлтүүлгийг тусгай харанхуй талбайн конденсатор ашиглан хийдэг. Харанхуй талбайн микроскоп нь маш энгийн боловч үр дүнтэй арга бөгөөд амьд болон толбогүй биологийн сорьцыг дүрслэхэд тохиромжтой. Суурилуулалтын хялбар байдлыг харгалзан үзэхэд гарсан зургийн чанар маш сайн байна.

Микроскоп хийх үед харанхуй талбайХэмжээ нь микрометрийн зуутын нэгээр хэмжигддэг объектуудыг харж болно, энэ нь ердийн тод талбайн микроскопын нарийвчлалаас давсан байна. Гэсэн хэдий ч харанхуй талбарт объектуудыг ажиглах нь зөвхөн эсийн контурыг судлах боломжийг олгодог бөгөөд тэдгээрийн дотоод бүтцийг судлах боломжгүй юм.

Люминесценц (флюресценц) микроскоп үл үзэгдэх хэт ягаан туяа эсвэл цэнхэр гэрлээр гэрэлтүүлэхэд биологийн гаралтай хэд хэдэн бодис эсвэл зарим будагч бодисууд гэрэлтэх чадварт үндэслэсэн. Хэт ягаан туяаг ашиглах үед микроскопын нарийвчлал 0.1 микрон хүрч болно.

Бичил биетний эсийг тусгай будагч бодисоор эмчилдэг - фторхромууд (акридин жүрж, примулин, родамин гэх мэт) өндөр шингэрүүлсэн усан уусмал хэлбэрээр: 1: 500-1: 100,000 Ийм уусмал нь бага зэрэг хортой бөгөөд энэ нь судлах боломжтой болгодог бүрэн бүтэн эс. Химийн найрлагаас хамааран эсийн бүтэц нь будагч бодисыг янз бүрийн хэмжээгээр шингээж, янз бүрийн аргаар гэрэлтдэг. Үүнээс гадна фторхромууд нь амьд ба үхсэн эсүүдээр өөр өөр шингэдэг. Энэ нь танд ашиглах боломжийг олгодог энэ төрөлцитологийн болон дархлаа судлалын судалгаанд зориулсан микроскоп, эсийн амьдрах чадварыг тодорхойлох гэх мэт.

Электрон микроскоп гэрэл эсвэл хэт ягаан туяаг ашиглах үед шийдэгдээгүй объектуудыг илрүүлэх боломжийг танд олгоно. Онолын хувьд зөвшөөрөл дамжуулах электрон микроскоп 0.002 нм; орчин үеийн бодит шийдэл электрон микроскопууд 0.1 нм-д ойртоно. Практикт биологийн объектуудын нягтрал нь 2 нм хүрдэг.

Электронуудын богино долгионы урт нь 0.5-1.0 нм хэмжээтэй объектуудыг ялгах боломжийг олгодог. Орчин үеийн электрон микроскопуудад дэлгэцэн дээр 5000-200,000 томруулдаг. Ийм өндөр нарийвчлалын ачаар бактерийн бүтцийг нарийн тодорхойлох боломжтой болдог. Жишээлбэл, нянгийн эргэн тойронд байгаа хүнд металлын давсыг шүршиж, гадаргуугийн тэгш бус байдалд нэвтэрч, электроны дифференциал саатлаас шалтгаалан тодосгогчийг олж авдаг. Энэ эффект гэж нэрлэгддэг сөрөг ялгаатай .

Дээжээр электрон дамжуулж (дамжуулах) дүрсийг үүсгэдэг электрон микроскоп гэж нэрлэдэг. тунгалаг (эсвэл дамжуулах ).

IN сканнердах электрон микроскоп (сканнердах электрон микроскоп (SEM))электрон цацраг нь дээжийн гадаргууг хурдан сканнердаж, гэрэлтдэг дэлгэц дээр дүрс үүсгэдэг цацраг үүсгэдэг. SEM нь өндөр нарийвчлалтай, томруулах өргөн хүрээтэй (100,000 ба түүнээс дээш), том фокусын гүн (~100 микрон), янз бүрийн үйлдлийн горимоор тодорхойлогддог. Сканнерийн микроскоп нь гадаргуугийн зургийг гаргаж, гурван хэмжээст дүрсийг авах боломжийг олгодог.

Лазер төвлөрсөн микроскоп Энэ нь тодорхой дүрсийг авах, бүх талбарт анхаарлаа төвлөрүүлж буй объектуудыг ажиглах боломжийг олгодог. Энэ арга нь зөвхөн өөрөө гэрэлтдэг (флюресцент) объектуудыг судлахад тохиромжтой. Компьютерийн технологитой хослуулснаар судалж буй объектыг орон зайн сэргээн босгох боломжтой. Төвлөрсөн лазер сканнерийн микроскопоор дотоод хэсгүүдийн зургийг янз бүрийн (405, 488, 532, 635 нм) лазераас төвлөрсөн лазер туяагаар сканнердаж, цацрагийг орон зайн шүүлтүүрээр бүрдүүлдэг. Ойрын талбайн сканнерийн микроскоп (NFSM) ашиглах үед өндөр нарийвчлалтай болно. SMBP ашиглан олж авсан хамгийн бага элементийн хэмжээ нь 0.486 нм гэрлийн долгионы уртад 20 нм байна. Хяналттай элементийн дүрс нь түүний хил хязгаарыг тодорхойлоход хүндрэл учруулдаг дифракц эсвэл хөндлөнгийн нөлөөг агуулдаггүй. Атомын хүчний микроскоптой харьцуулахад SMBM-ийн нэг онцлог шинж чанар нь туршиж буй дээжийн гадаргуугийн оптик шинж чанар, гэрлийн долгионы урт, гэрэлтэх чадвар гэх мэт мэдрэг чанар юм.

Компьютерийн интерференцийн микроскоп эсийн доорх бүтцийг ажиглахдаа өндөр тодосгогч дүрсийг авах боломжийг танд олгоно; ихэнх тохиолдолд амьд эсийг судлахад ашигладаг. Автомат интерференцийн микроскопын ажиллах зарчим нь жишиг толь болон хэмжиж буй фазын объектыг байрлуулсан толин тусгалаас туссан лазерын цацрагийн гэрлийн цацрагийн хөндлөнгийн оролцоонд суурилдаг. Онолын хувьд хүрч болох хамгийн дээд нарийвчлал нь дунджаар 0.2 нм байж болох ч практик дээр 0.4 микрон байна.

Рентген томографи (XCT), позитрон ялгаралтын томографи (PAT) хэвийн нөхцөлд объектыг ажиглах боломжийг танд олгоно.

Микроскопи(лат. μΙκροσ - жижиг, жижиг, σκοποσ - Би харж байна) - микроскоп ашиглан объектуудыг судлах. Үүнийг хэд хэдэн төрөлд хуваадаг: оптик микроскоп, электрон микроскоп, рентген эсвэл рентген лазерын микроскопи нь цахилгаан соронзон туяаг ашиглан тухайн бодисын ул мөр элементийн дүрсийг шалгаж, олж авах чадвартай байдаг. төхөөрөмжүүд ().

Оптик микроскоп.Хүний нүд бол байгалийн оптик систем бөгөөд тодорхой нарийвчлалтай, өөрөөр хэлбэл ажиглагдаж буй объектын элементүүдийн хоорондох хамгийн бага зай (цэг эсвэл шугам гэж ойлгогддог) бөгөөд тэдгээр нь бие биенээсээ ялгагдах боломжтой хэвээр байна. Энгийн нүдний хувьд объектоос холдох гэж нэрлэгддэг. хамгийн сайн харааны зай (D = 250 мм), дундаж хэвийн нарийвчлал нь 0.176 мм байна. Бичил биетний хэмжээ, ихэнх ургамал, амьтны эсүүд, жижиг талстууд, металл ба хайлшийн бичил бүтцийн дэлгэрэнгүй мэдээлэл гэх мэт нь энэ үзүүлэлтээс хамаагүй бага байна. Микроскопууд нь ийм объектыг ажиглах, судлах зориулалттай. янз бүрийн төрөл. Микроскопыг бичил биетийн хэлбэр, хэмжээ, бүтэц болон бусад олон шинж чанарыг тодорхойлоход ашигладаг.

Оптик эсвэл гэрлийн микроскоп нь ил тод объектоор дамжин өнгөрөх эсвэл тунгалаг бусаас ойсон харагдах гэрлийг ашигладаг. Хэд хэдэн линз бүхий оптик систем нь дээжийн томруулсан дүрсийг авах боломжийг олгодог. Үүссэн дүрсийг нүдээр (эсвэл хоёр нүд, дурангаар) ажиглаж, зураг авч, дижитал хэлбэрт шилжүүлэхийн тулд видео камер руу шилжүүлж болно. Орчин үеийн микроскоп нь ихэвчлэн гэрэлтүүлгийн систем, объектыг хөдөлгөх ширээ (загвар), тусгай линз, нүдний шил зэргийг багтаадаг.

Уламжлалт оптик микроскопийн чадварыг мэдэгдэхүйц өргөжүүлэх боломжтой микроскопуудын төрлийг боловсруулсан.

1950-иад он хүртэл тэд үндсэндээ харагдах гэрлийн спектрт ажилладаг байв. Нүд нь оптик долгионы уртад ажилладаг. Оптик микроскопууд нь лавлагаа цацрагийн долгионы хагас мөчлөгөөс бага нарийвчлалыг хангаж чадахгүй (харагдах хүрээний хувьд долгионы урт нь 0.2-0.7 мкм буюу 200-700 нм). Оптик микроскопын хамгийн их өсгөлт нь 2000 дахин их байдаг. Зургийг цаашид томруулах нь бодит бус байсан, учир нь энэ нь бодисын бүтцийн нэмэлт нарийн ширийн зүйлийг илрүүлэх боломжийг бидэнд олгосонгүй. Ойролцоогоор 0.15 микрон хүртэл хэмжээтэй бие даасан тоосонцор нь 2000 дахин томруулсан үед тод харагддаг. Жижиг хэсгүүд нь гэрлийн цацрагийг тусгадаггүй бөгөөд микроскопоор харагдахгүй.

Томруулсан дүрсийг авахын тулд электрон туяа ашигладаг багаж - электрон микроскоп ашиглан хатуу бодисын бичил бүтэц, тэдгээрийн орон нутгийн найрлага, микро талбарыг (цахилгаан, соронзон гэх мэт) судлах электрон датчикийн аргуудын багц. Электрон микроскоп нь судалж буй объектыг бэлтгэх, олж авсан мэдээллийг боловсруулах, шинжлэх арга техникийг агуулдаг. Тохиромжтой төрлийг ашиглахад үндэслэсэн электрон микроскопийн хоёр үндсэн чиглэл байдаг: дамжуулах (дамжуулах) ба растер (сканнердах). Эдгээр нь судалгааны объектын талаар чанарын хувьд ялгаатай мэдээлэл өгдөг бөгөөд ихэвчлэн хамтдаа ашиглагддаг. Тусгал, ялгаралт, Auger электрон, Лоренц болон бусад төрлийн электрон микроскопууд нь мэдэгдэж байгаа бөгөөд ихэвчлэн электрон микроскопыг дамжуулах, сканнердах хавсралтуудыг ашиглан хэрэгжүүлдэг.

Рентген туяаны микроскоп - рентген туяа ашиглан бодисын микроскопийн бүтцийг судлах аргуудын багц. Рентген туяаны микроскоп нь рентген микроскоп гэж нэрлэгддэг тусгай багаж хэрэгслийг ашигладаг. Нарийвчлал нь 100 нм хүрдэг бөгөөд энэ нь оптик микроскопоос (200 нм) 2 дахин их юм. Онолын хувьд рентген туяа нь оптик микроскопоос 2 дахин илүү нарийвчлалтай (рентген цацрагийн долгионы урт нь 2 дахин богино байдаг тул) илүү сайн нарийвчлалтай болгодог. Гэсэн хэдий ч орчин үеийн оптик микроскоп - наноскоп нь 3-10 нм хүртэлх нарийвчлалтай байдаг.

Рентген туяаны микроскопийг дараахь байдлаар хуваана.

• Тусгал микроскоп
• Проекцийн микроскоп
• Электрон микроскоп
• Рентген лазерын микроскоп

Бичил биетний хамгийн бага хэмжээ нь нянгийн морфологийг судлах нарийн оптик багаж - микроскоп ашиглахыг тодорхойлдог. Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг микроскопууд нь тод талбайн микроскоп, харанхуй талбайн микроскопи, фазын тодосгогч бичил харуур, флюресцент микроскоп юм. Микробиологийн тусгай судалгаанд электрон микроскоп ашигладаг.

Гэрэлт талбайн микроскоп

Гэрэлт талбайн микроскопыг ердийн гэрлийн микроскоп ашиглан хийдэг бөгөөд гол хэсэг нь линз юм. Томруулагчийг линзний хүрээн дээр харуулав: 8, 10, 20, 40, 90.

Микробыг судлахдаа усанд дүрэх систем (линз) ашигладаг. Усанд дүрэх линз нь бэлдмэлд хэрэглэсэн хуш модны дуслаар дүрнэ. Хуш модны тос нь шилтэй ижил хугарлын илтгэгчтэй бөгөөд энэ нь гэрлийн цацрагийн хамгийн бага тархалтыг бий болгодог (Зураг 1.12).

Цагаан будаа. 1.12. Усанд дүрэх линз дэх цацрагийн зам

Линзэнд авсан дүрсийг хоёр линзээс бүрдсэн нүдний шилээр томруулдаг. Дотоодын микроскопууд нь 7, 10, 15 томруулсан нүдний шилийг ашигладаг (Зураг 1.13). Микроскопын нийт томруулалтыг объектив болон нүдний шилний томруулалтын үржвэрээр тодорхойлно. Микробиологийн хувьд ихэвчлэн 900-1000 дахин томруулдаг. Микроскопын чанар нь томруулах зэргээс биш харин түүний нарийвчлалаас хамаардаг.

Цагаан будаа. 1.13. Хөлерийн гэрэлтүүлэгт тохируулсан тод талбайн ажиглалтад зориулсан нийлмэл гэрлийн микроскопын бүдүүвч

Үүгээр бид бэлдмэлийн хоёр цэгийн хоорондох хамгийн бага зайг ойлгох ёстой бөгөөд тэдгээр нь микроскопоор тодорхой ялгагдах боломжтой хэвээр байна. Усанд дүрэх системтэй ердийн гэрлийн микроскопуудын нарийвчлал нь 0.2 микрон юм.

Харанхуй талбайн микроскоп

Харанхуй талбайн микроскоп дээр үндэслэсэн баримтлах зарчим(Зураг 1.14). Цацрагууд нь объектыг доороос нь биш, харин хажуу талаас нь гэрэлтүүлж, ажиглагчийн нүд рүү ордоггүй: харах талбар нь харанхуй хэвээр үлдэж, объект нь түүний дэвсгэр дээр гэрэлтдэг. Үүнийг төв хэсэгт хар цаасаар бүрхсэн тусгай конденсатор (параболоид) эсвэл ердийн конденсатор ашиглан хийдэг.

Цагаан будаа. 1.14. Харанхуй талбайд ажиглалт хийх микроскопын диаграмм.

Харанхуй талбайн микроскопийн бэлдмэлийг "өлгөөтэй" ба "буталсан" дуслын төрлөөр бэлтгэдэг. Бэлдмэлийг бэлтгэхдээ туршилтын материалын "буталсан" дуслыг (физиологийн уусмал дахь нянгийн өсгөвөр) шилэн слайд дээр түрхэж, нөмрөгөөр хучдаг. Материалын дусал нь бүрхүүлийн шил ба гулсуур хоорондын зайг бүхэлд нь дүүргэж, жигд давхарга үүсгэдэг. Өлгөгдсөн дуслыг бэлтгэхийн тулд голд нь хонхорхой бүхий тусгай шилэн гулсуурыг ашиглах шаардлагатай бөгөөд гулсуурыг хаах хэрэгтэй.

Туршилт хийх материалыг бүрээсний шилний дунд хэсэгт хэрэглэнэ. Слайд дээрх завсарлагааны ирмэгийг вазелинаар түрхэж, таглаатай шилээр хучсан бөгөөд ингэснээр дусал нь завсарлагааны төв хэсэгт байрладаг. Дараа нь таглаатай шилийг дээш харуулан бэлдмэлээ эргүүлнэ. Харанхуй талбайн микроскопийг амьд, толбогүй бичил биетнийг судлахад ашигладаг.

Фазын тодосгогч микроскоп

Будаггүй биетээр гэрлийн туяа өнгөрөхөд зөвхөн гэрлийн долгионы хэлбэлзлийн үе шат өөрчлөгддөг бөгөөд энэ нь хүний ​​нүдэнд мэдрэгддэггүй. Зургийг тодосгогч болгохын тулд гэрлийн долгионы фазын өөрчлөлтийг харагдах далайц болгон хувиргах шаардлагатай. Энэ нь фазын тодосгогч конденсатор ба фазын зорилтыг ашиглан хийгддэг (Зураг 1.15).

Цагаан будаа. 1.15. Фазын тодосгогч микроскопын диаграмм.

Фазын тодосгогч конденсатор нь револьвер бүхий ердийн линз бөгөөд линз тус бүрт зориулсан цагираг хэлбэрийн диафрагм юм. Фазын линз нь фазын хавтангаар тоноглогдсон бөгөөд үүнийг линз дээр газрын ховор элементийн давс түрхэх замаар олж авдаг. Цагираг хэлбэрийн диафрагмын дүрс нь харгалзах линзний фазын хавтангийн цагирагтай давхцдаг.

Фазын тодосгогч бичил харуур нь объектын тодосгогчийг ихээхэн нэмэгдүүлж, уугуул бэлдмэлийг судлахад ашигладаг.

Флюресцент микроскоп

Люминесценцийн микроскоп нь зарим бодисууд дээр туссан гэрлийн нөлөөн дор өөр (ихэвчлэн илүү урт) долгионы урттай (флюресцент) цацраг ялгаруулах чадварт суурилдаг. Ийм бодисыг фторохром (акридин шар, родамин гэх мэт) гэж нэрлэдэг. Хэт ягаан туяагаар гэрэлтүүлэх үед фторохромоор эмчилсэн объектыг олж авдаг тод өнгөхаранхуй талбарт.

Флюресцент микроскопын гол хэсэг нь хэт ягаан туяа, түүнд зориулсан шүүлтүүрийн систем бүхий гэрэлтүүлэгч юм (Зураг 1.16). Флюресцентгүй дүрэх тосыг хэрэглэх нь маш чухал юм.
Практик микробиологи дахь гэрэлтэгч микроскопийг халдварт өвчний эмгэг төрүүлэгчдийг тодорхойлох, тодорхойлоход ашигладаг.

Цагаан будаа. 1.16. Флюресцент микроскопын бүдүүвч дүрслэл: 1 - нуман гэрэл; 2 - кварцын коллектор; 3 - зэсийн сульфатын уусмалаар дүүргэсэн кювет; 4 - коллекторын урд хэсэг; 5 - хэт ягаан туяаны шүүлтүүр; 6 - призм; 7 - ураны шилэн хавтан; 8 - нүдний шилний шүүлтүүр, шингээх
хэт ягаан туяа.

Электрон микроскоп

Оптик микроскопын чадвар нь харагдах гэрлийн хэт урт долгионы уртаар (6000 А) хязгаарлагддаг. Энэ утгаас бага объектууд нь гэрлийн микроскопын нарийвчлалаас хэтэрсэн байна. Электрон микроскопод гэрлийн долгионы оронд хэт богино долгионы урттай, өндөр нарийвчлалтай электрон цацрагийг ашигладаг (Зураг 1.17).

Цагаан будаа. 1.17. Дамжуулах электрон микроскопын схем.

Электрон бууг электрон цацрагийн эх үүсвэр болгон ашигладаг бөгөөд үүний үндэс нь халсан вольфрамын судал юм. цахилгаан цочрол. Гянт болдын судал ба анодын хооронд электронуудын зам байдаг цахилгаан оронөндөр хүчдэл. Электрон урсгал нь фосфоресцент дэлгэцийг гэрэлтүүлэхэд хүргэдэг. Хэсэг нь өөр өөр зузаантай объектоор дамжин өнгөрөхөд электронууд зохих ёсоор саатах бөгөөд энэ нь дэлгэцэн дээр харанхуй хэсэг болж харагдах болно. Объект нь тодосгогчийг олж авдаг.

Электрон микроскопийн бэлдмэлийг хамгийн нимгэн коллоид хальсан дээр бэлтгэж, тэдгээрийг хатаасны дараа ("уугуул бэлдмэл"), хүнд металлаар цацаж, хуулбарлах аргыг ашиглан хэт нимгэн хэсгүүдийг шалгана.

Электрон микроскоп нь хамгийн жижиг бүтцийг илрүүлж, 200,000 хүртэл томруулж, 0.002 микрон хүртэл жижиг объектуудыг харж чаддаг.

Л.В. Тимощенко, М.В. Чубик