హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ (d. హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్‌లతో విభాగాలను మరక చేసే విధానం) పారాఫిన్ విభాగాలకు విరుద్ధంగా

జెలటిన్ లోకి పోయడం పద్ధతి.

పద్ధతి పిండం కోసం అనుకూలంగా ఉంటుంది. అధ్యయనాలు, కొవ్వులు మరియు లిపోయిడ్లను గుర్తించడానికి అధ్యయనాల కోసం, వదులుగా ఉన్న కణజాలాలు మరియు అవయవాలను నింపడం (ముడతలు పడదు). జెలటిన్ బ్లాక్ ఘనీభవన మైక్రోటోమ్‌తో మాత్రమే కత్తిరించబడుతుంది.

పూరించడానికి రెండు పరిష్కారాలు తయారు చేయబడ్డాయి:

a) 25% పరిష్కారం: 25 గ్రా చూర్ణం లేదా పొడి జెలటిన్ నీటి స్నానంలో (37 ° వద్ద) 75 ml 1% కార్బోలిక్ నీటిలో కరిగించబడుతుంది (బాష్పీభవనాన్ని నివారించడానికి నౌకను మూసివేయాలి);

బి) 12.5% ​​పరిష్కారం: మందపాటి ద్రావణంలో 1 భాగం వెచ్చని 1% కార్బోలిక్ నీటిలో 1 భాగంతో కరిగించబడుతుంది. తరువాతి సిద్ధం చేయడానికి, కార్బోలిక్ యాసిడ్ యొక్క 1 గ్రా స్థిరమైన వణుకుతో 100 ml స్వేదనజలంలో కరిగిపోతుంది.

తయారుచేసిన జెలటిన్ ద్రావణాలను ప్రత్యేక పరీక్ష గొట్టాలు లేదా ఇతర చిన్న నాళాలలో భాగాలుగా పోస్తారు,

దీనిని సిద్ధం చేయడానికి, 2.0 గ్రా హెమటాక్సిలిన్ 100 ml 96% ఆల్కహాల్ మరియు 100 ml స్వేదనజలం, 100 ml గ్లిజరిన్, 3.0 గ్రా పొటాషియం అల్యూమ్ మరియు 10 ml గ్లేసియల్ ఎసిటిక్ యాసిడ్ ఫలితంగా ద్రావణంలో కరిగించబడుతుంది. అన్ని పదార్థాలు పేర్కొన్న క్రమంలో జోడించబడాలి. ఫలిత ద్రావణాన్ని కాంతిలో ఉంచాలి మరియు కనీసం 15 రోజులు గాలికి ప్రాప్యత కలిగి ఉండాలి, తద్వారా హెమటాక్సిలిన్ హేమాటిన్‌గా ఆక్సీకరణం చెందడానికి సమయం ఉంటుంది, ఇది రంగు. ద్రావణంతో కూడిన కూజా కాగితపు టోపీ లేదా గాజుగుడ్డతో అనేక సార్లు ముడుచుకున్నది. ఎర్లిచ్ యొక్క హెమటాక్సిలిన్ న్యూక్లియైలను మరక చేస్తుంది నీలం రంగు. సైటోప్లాజమ్‌ను మరక చేయడానికి, ఇయోసిన్ యొక్క 1% సజల ద్రావణాన్ని ఉపయోగించండి.

ఈ సాంకేతికత సర్వసాధారణంగా ఉపయోగించబడుతుంది మరియు అందువల్ల మరింత వివరంగా వివరించాలి. సెల్లోయిడిన్ విభాగాలు, డీవాక్స్ చేయబడిన విభాగాలు, పారాఫిన్ విభాగాలు లేదా స్తంభింపచేసిన విభాగాలను మరక చేయడానికి ఈ పద్ధతిని ఉపయోగించవచ్చు. మరకకు ముందు, ఘనీభవించిన విభాగాలను 20-30 నిమిషాలు లేదా రాత్రిపూట 96% ఆల్కహాల్‌లో ఉంచడం ద్వారా వాటిని క్షీణింపజేయాలి. తరువాత, విభాగాలు స్వేదనజలానికి బదిలీ చేయబడతాయి. Celloidin విభాగాలు వక్ర ముగింపుతో విచ్ఛేదనం సూదిని ఉపయోగించి ఒక సీసా నుండి మరొకదానికి బదిలీ చేయబడతాయి. డీఫారాఫినైజ్డ్ మరియు స్తంభింపచేసిన విభాగాలు తగిన పరిష్కారాలను పోయడం లేదా పోయడం ద్వారా గాజు స్లయిడ్‌లపై తడిసినవి. డై సొల్యూషన్స్‌ని తిరిగి వాడుకోవడానికి తిరిగి పోయవచ్చు.

హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్తో విభాగాలను మరక చేసే విధానం క్రింది విధంగా ఉంటుంది::

1) విభాగాలు స్వేదనజలానికి బదిలీ చేయబడతాయి;

2) 2-5 నిమిషాలు ఎర్లిచ్ హెమటాక్సిలిన్‌తో మరక;

3) స్వేదనజలంలో కడుగుతారు;

4) అప్పుడు కడుగుతారు కుళాయి నీరు 3-5 నిమిషాలు;

5) సూక్ష్మదర్శిని క్రింద నియంత్రణను నిర్వహించండి;

6) హైడ్రోక్లోరిక్ యాసిడ్ యొక్క 1% ద్రావణంతో 70 ° ఆల్కహాల్‌లో 1-2 సెకనుకు వేరు చేయండి;

7) తరచుగా మార్పులతో 30 నిమిషాలు పంపు నీటిలో విభాగాలను త్వరగా బదిలీ చేయండి; పంపు నీటిలో, కెర్నలు యొక్క చెర్రీ రంగు నీలం రంగులోకి మారుతుంది;



8) సూక్ష్మదర్శిని క్రింద నియంత్రణను నిర్వహించండి; క్రోమాటిన్ మరియు న్యూక్లియోలస్ స్పష్టంగా కనిపించకపోతే, అప్పుడు భేదం పునరావృతం చేయాలి (విభాగాలను అధిక మాగ్నిఫికేషన్‌లో చూడవచ్చు, వాటిని కవర్‌లిప్‌తో కప్పవచ్చు);

9) స్వేదనజలంలో కడుగుతారు;

10) ఇయోసిన్ యొక్క 1% సజల ద్రావణం 0.5-1 నిమి;

11) స్వేదనజలంలో కడుగుతారు (మరియు విభిన్నంగా ఉంటుంది, ఎందుకంటే నీరు ఇయోసిన్‌ను కడుగుతుంది); వాషింగ్ సమయం కట్ యొక్క రంగు ద్వారా నియంత్రించబడుతుంది;

12) నిర్జలీకరణం జరుగుతుంది, జిలీన్‌లో స్పష్టం చేయబడుతుంది మరియు ఔషధతైలం ఉంచబడుతుంది. ఆల్కహాల్‌లో ఇయోసిన్ కూడా కొట్టుకుపోతుంది, కాబట్టి ఆల్కహాల్ ఉపయోగించి విభాగాలను త్వరగా తయారు చేయాలి. హెమటాక్సిలిన్ స్టెయినింగ్ కోసం సమయం మొదటి 2-3 విభాగాలలో సెట్ చేయబడాలి మరియు ఈ బ్లాక్ యొక్క అన్ని విభాగాలు ఒకే విధంగా మరక చేయాలి. ఆల్కహాల్‌లోని హైడ్రోక్లోరిక్ యాసిడ్ యొక్క ద్రావణంలో భేదం నిర్వహించబడకపోవచ్చు, అయితే ఈ సందర్భంలో కేంద్రకం యొక్క నిర్మాణాలు తక్కువ స్పష్టంగా ఉంటాయి మరియు సైటోప్లాజంలో నీలిరంగు నేపథ్యం ఉండవచ్చు.

ఈ మరక రెట్టింపు: హెమటాక్సిలిన్, ఒక ప్రాథమిక రంగు, స్టెయిన్ సెల్ న్యూక్లియైలు, ఇయోసిన్, ఒక ఆమ్ల రంగు, కణాల ప్రోటోప్లాజమ్‌ను మరక చేస్తుంది మరియు కొంతవరకు, వివిధ నాన్-సెల్యులార్ నిర్మాణాలు.

కలరింగ్ అనేది బేస్ డైని ఉపయోగించడం హెమటాక్సిలిన్, ఇది బాసోఫిలిక్ సెల్యులార్ నిర్మాణాలను ప్రకాశవంతమైన నీలం మరియు ఆల్కహాలిక్ యాసిడ్ డైని మరక చేస్తుంది ఇయోసిన్ వై, సెల్ రెడ్-పింక్ యొక్క ఇసినోఫిలిక్ నిర్మాణాలను మరక చేస్తుంది. బాసోఫిలిక్ నిర్మాణాలు సాధారణంగా కలిగి ఉంటాయి న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు(DNAమరియు RNA):కణ కేంద్రకం,రైబోజోములుమరియు RNA అధికంగా ఉన్న ప్రాంతాలు సైటోప్లాజం. ఇసినోఫిలిక్ నిర్మాణాలు ఇంట్రా- మరియు ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్‌ను కలిగి ఉంటాయి ఉడుతలు, ఉదాహరణకి, లెవీ శరీరాలు. సైటోప్లాజమ్ అనేది ఇసినోఫిలిక్ వాతావరణం. ఎర్ర రక్త కణాలుఎల్లప్పుడూ ప్రకాశవంతమైన ఎరుపు పెయింట్.

2. ఐరన్ హెమటాక్సిలిన్‌తో మరక

మైక్రోస్కోపిక్ సన్నాహాలు కోసం రంగు. విభాగాలలో (పారాఫిన్, క్రియోస్టాట్, వైబ్రోటోమ్, ఘనీభవన మైక్రోటోమ్‌లో తయారు చేయబడినవి) మరియు సైటోలాజికల్ సన్నాహాలలో సెల్ న్యూక్లియై యొక్క విజువలైజేషన్‌ను అందిస్తుంది. రియాజెంట్‌లో ఇథనాల్ మరియు మిథనాల్ ఉండవు. వాన్ గిసన్, మల్లోరీ, మాసన్ మరియు ఇతర బహుళ-రంగు స్టెయినింగ్ పద్ధతుల ప్రకారం బంధన కణజాలాన్ని మరక చేసేటప్పుడు అణు రంగుగా ఉపయోగించడానికి ఉద్దేశించబడింది హిస్టోలాజికల్ సన్నాహాలు. ప్రతిపాదిత హెమటాక్సిలిన్ యొక్క ప్రయోజనాలు విభాగాలలో కణ కేంద్రకాల యొక్క అద్భుతమైన మరియు తీవ్రమైన మరక, పిక్రిక్ యాసిడ్ మరియు ఇతర బలహీన ఆమ్లాలకు రంగు స్థిరత్వం, ఔషధాన్ని తిరిగి రంగులోకి మార్చే ధోరణి (సిఫార్సులకు లోబడి) మరియు రంగు భేదం అవసరం.

3. లెఫ్లర్ యొక్క మిథైలీన్ బ్లూతో మరకకలరింగ్ టెక్నిక్. 100 ml 0.01% పొటాషియం హైడ్రాక్సైడ్ ద్రావణంతో 30 ml మిథిలిన్ బ్లూ యొక్క సంతృప్త ఆల్కహాల్ ద్రావణాన్ని కలపండి. స్మెర్స్ 3 - 5 నిమిషాలు తడిసినవి, నడుస్తున్న నీటిలో కడిగి, 0.5% ఎసిటిక్ యాసిడ్ ద్రావణంలో 3 సెకన్ల పాటు వేరు చేయబడతాయి మరియు నడుస్తున్న నీటిలో కడిగివేయబడతాయి. ఆల్కహాల్ గుండా వెళుతుంది, జిలీన్‌లో స్పష్టం చేయండి మరియు ఔషధతైలం వేయండి. ఒక ఔషధతైలం లో మూసివేయబడకుండా నూనె ఇమ్మర్షన్ ద్వారా సన్నాహాలు అధ్యయనం చేయవచ్చు, కానీ ఈ సందర్భంలో అవి ఎక్కువ కాలం నిల్వ చేయబడవు. ఫలితం: బ్యాక్టీరియా లోతైన నీలం రంగులోకి మారుతుంది.

ఆర్గానిక్ బేసిక్ థియాజిన్ రంగు వేయు, కలరింగ్ కోసం ఉపయోగిస్తారు పత్తి,ఉన్ని,పట్టుచీరలుప్రకాశవంతమైన నీలం రంగులో, కానీ రంగు కాంతిలో బలహీనంగా స్థిరంగా ఉంటుంది. IN విశ్లేషణాత్మక రసాయన శాస్త్రంనిర్ణయించడానికి ఉపయోగిస్తారు క్లోరేట్స్,పెర్క్లోరేట్స్,కాటయాన్స్పాదరసం,తగరం,మెగ్నీషియం,కాల్షియం,కోబాల్ట్,కాడ్మియం.

IN మందుగా ఉపయోగించబడింది క్రిమినాశక,విరుగుడువిషం విషయంలో సైనైడ్లు,కార్బన్ మోనాక్సైడ్మరియు హైడ్రోజన్ సల్ఫైడ్. ఈ సమ్మేళనం చికిత్సలో అత్యంత ప్రభావవంతమైనదిగా నివేదించబడింది అల్జీమర్స్ వ్యాధి.

4. picrofuchsin తో రంజనం

పిక్రోఫుచ్‌సిన్‌తో తడిసినప్పుడు, ఉబ్బిన కొల్లాజెన్ కట్టలు ప్రకాశవంతమైన ఎరుపు రంగులో ఉంటాయి, పేలవంగా గుర్తించదగిన ఫైబరస్ నిర్మాణంతో సజాతీయంగా ఉంటాయి. మరింత తీవ్రమైన నష్టం ఉన్న ప్రాంతాల్లో, కొల్లాజెన్ కట్టలు అసమాన రంగులో ఉంటాయి, కొన్ని ప్రదేశాలలో అవి ప్రకాశవంతమైన ఎరుపు రంగులో ఉంటాయి, మరికొన్ని మచ్చలతో ఉంటాయి. పసుపు రంగు, ప్రదేశాలలో గోధుమ. 5. రోమనోవ్స్కీ-గీమ్సా స్టెయినింగ్అద్దకం యొక్క తయారీ స్మెర్స్‌ను మరక చేయడానికి ముందు, పూర్తయిన ద్రవ రంగు 1 ml స్వేదనజలానికి 1-2 చుక్కల రంగు చొప్పున కరిగించబడుతుంది. తేమతో కూడిన గదిలో 370 C వద్ద 20 - 25 నిమిషాలు స్మెర్స్ తడిసినవి (దిగువలో తేమతో కూడిన ఫిల్టర్‌తో మూసివేయబడిన పెట్రీ డిష్). రంజనం తర్వాత, స్మెర్స్ నడుస్తున్న నీటిలో కడుగుతారు, గాలి ఎండబెట్టి మరియు చమురు ఇమ్మర్షన్ కింద పరిశీలించబడుతుంది. పొడి రూపంలో (వాణిజ్య రంగు) రోమనోవ్స్కీ-గీమ్సా డై మిశ్రమం మిథైల్ ఆల్కహాల్ మరియు గ్లిజరిన్ (100 ml ద్రావకంలో 800 mg డై) సమాన వాల్యూమ్‌ల మిశ్రమంలో కరిగించబడుతుంది. రంగు బాగా కరిగిపోదు, కాబట్టి 100 ml కి 300 mg మొత్తంలో ద్రావకంతో రుబ్బు చేయడం మంచిది, ఆపై, గందరగోళాన్ని, కావలసిన ఏకాగ్రత పొందే వరకు రంగును జోడించండి. రంగును సిద్ధం చేయడానికి తరచుగా చాలా రోజులు పడుతుంది. రసాయనికంగా స్వచ్ఛమైన మిథైల్ ఆల్కహాల్ మరియు గ్లిజరిన్‌లను ద్రావకాలుగా ఉపయోగించడం చాలా ముఖ్యం, ఎందుకంటే మలినాలు రంగు యొక్క లక్షణాలను దెబ్బతీస్తాయి. మిథైల్ ఆల్కహాల్‌కు బదులుగా, మీరు 100% ఇథైల్ ఆల్కహాల్‌ను ఉపయోగించవచ్చు. సిద్ధం చేసిన కలరింగ్ మిశ్రమం గట్టిగా మూసివేసిన కంటైనర్‌లో చల్లని, పొడి ప్రదేశంలో నిల్వ చేయబడుతుంది. స్టెయినింగ్ టెక్నిక్ 1. మిథైల్ ఆల్కహాల్‌లో అమర్చిన స్మెర్స్‌లు 40-120 నిమిషాల పాటు (రెడిమేడ్ లిక్విడ్ పెయింట్ యొక్క 1 ml + 2 ml బేసిక్ బఫర్ ద్రావణం + 47 ml డిస్టిల్డ్ వాటర్) ఒక ద్రావణంతో తడిసినవి (రకాల వ్యవధి అనుభవపూర్వకంగా ఎంపిక చేయబడుతుంది. ) వారు ఫాస్ఫేట్ బఫర్‌ను ఉపయోగిస్తారు, అయితే బఫర్ యొక్క pH స్మెర్ రకాన్ని బట్టి ఉంటుంది: ఎముక మజ్జ స్మెర్ కోసం - 5.8 - 6.0, బ్లడ్ స్మెర్ కోసం - 6.4 - 6.5, ప్రోటోజోవాను గుర్తించడానికి - 6.8, మలేరియా ప్లాస్మోడియం - 7, 0 - 7.2. 2. స్వేదనజలంలో కడిగి, పొడిగా మరియు ఇమ్మర్షన్ కింద పరిశీలించండి. ఫలితం: బ్యాక్టీరియా వైలెట్-ఎరుపు రంగులో ఉంటుంది, కణాల సైటోప్లాజమ్ నీలం రంగులో ఉంటుంది మరియు న్యూక్లియైలు ఎరుపు రంగులో ఉంటాయి.

6. కాంగో ఎరుపు రంగుతో మరక

స్వరూపం - ఎరుపు-గోధుమ స్ఫటికాలు. చల్లని నీటిలో పేలవంగా కరుగుతుంది. IN సేంద్రీయ ద్రావకాలుఈ రంగును మైక్రోస్కోపిక్ అధ్యయనాలలో ఉపయోగించబడుతుంది మరియు కణ త్వచాన్ని మరక చేయడానికి ఆల్కహాల్, సజల లేదా అమ్మోనియా ద్రావణంలో ఉపయోగించబడుతుంది. పుట్టగొడుగులు(ఒంటరిగా లేదా కలిపి జెంటియన్ వైలెట్) . అమిలాయిడ్‌ను గుర్తించడానికి హిస్టాలజీలో కాంగో ఎరుపును విస్తృతంగా ఉపయోగిస్తారు . ఈ "క్లాసికల్" అప్లికేషన్‌తో పాటు, కాంగో రెడ్ అకశేరుక జంతుశాస్త్రం, బొటానికల్ పరిశోధన, మానవ మరియు జంతు సైటోలజీలో డజన్ల కొద్దీ ఇతర మరక ప్రక్రియలలో ఉపయోగించబడుతుంది. .

హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్ అనేది విభాగాలను మరక చేయడానికి అత్యంత సాధారణ పద్ధతి. ఈ పద్ధతి అన్ని సెల్యులార్ ఎలిమెంట్స్ మరియు కొన్ని నాన్-సెల్యులార్ నిర్మాణాలను సంపూర్ణంగా గుర్తించడం ద్వారా ఒక అవయవ భాగాల మధ్య సంబంధాలను ఏర్పరుస్తుంది. దాదాపు అన్ని సందర్భాల్లో, చేతిలో ఉన్న పనితో సంబంధం లేకుండా, హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్ ఉపయోగించబడుతుంది. చాలా సందర్భాలలో, వ్యాధి ఫలితంగా సాధారణ లేదా మార్చబడిన అవయవం యొక్క నిర్మాణాన్ని అధ్యయనం చేయడానికి, ఈ రంజనం పద్ధతికి పరిమితం చేయబడింది. ఇతర సందర్భాల్లో, పరిశోధకుడు ఒక ప్రత్యేక పనిని ఎదుర్కొన్నప్పుడు, ప్రత్యేక పద్ధతులు ఉపయోగించబడతాయి, అదే సమయంలో హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్తో సమాంతరంగా అనేక విభాగాలను మరక చేస్తుంది.

ఈ మరక రెట్టింపు: హెమటాక్సిలిన్, ఒక ప్రాథమిక రంగు, స్టెయిన్ సెల్ న్యూక్లియైలు, ఇయోసిన్, ఒక ఆమ్ల రంగు, కణాల ప్రోటోప్లాజమ్‌ను మరక చేస్తుంది మరియు కొంతవరకు, వివిధ నాన్-సెల్యులార్ నిర్మాణాలు.

7. హిస్టోలాజికల్ స్ట్రక్చర్స్ యొక్క బాసోఫిలిక్ స్టెయినింగ్ అనే పదానికి అర్థం ఏమిటి?

ప్రాథమిక రంగులతో సెల్యులార్ మరియు కణజాల నిర్మాణాల మరక.

8. హిస్టోలాజికల్ స్ట్రక్చర్స్ యొక్క ఆక్సిఫిలిక్ స్టెయినింగ్ అనే పదానికి అర్థం ఏమిటి?

ఆమ్ల రంగులతో సెల్యులార్ మరియు కణజాల నిర్మాణాల మరక.

9. హిస్టోలాజికల్ సన్నాహాలను అధ్యయనం చేయడానికి ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపిక్ పద్ధతులు.

ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపిక్ సైటోకెమిస్ట్రీ, ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపిక్ ఇమ్యునోసైటోకెమిస్ట్రీ మరియు ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపిక్ ఆటోరాడియోగ్రఫీ

10. హిస్టోలాజికల్ సన్నాహాలను అధ్యయనం చేయడానికి హిస్టోకెమికల్ పద్ధతులు.

ఎ) హిస్టోకెమికల్ పద్ధతులు ఆధారపడి ఉంటాయిఒక నిర్దిష్ట ప్రతిచర్యపైఒక రసాయన కారకం మరియు ఔషధం యొక్క నిర్దిష్ట భాగం మధ్య. బి) ఫలిత ప్రతిచర్య ఉత్పత్తి అసలు కారకం యొక్క రంగు నుండి భిన్నమైన రంగును కలిగి ఉంటుంది.

1a) RNA

బ్రాచెట్ ప్రతిచర్య.

1. రియాజెంట్ (గుర్తించినట్లుగా, రెండు రంగుల మిశ్రమం: మిథైల్ గ్రీన్ మరియు పైరోనిన్.

2. ఎ) ఎ. పైరోనిన్ ప్రత్యేకంగా మరకలుRNA లో ఎరుపు రంగు. బి. కాబట్టి, తయారీలో, న్యూక్లియోలి (కేంద్రకంలో భాగంగా) మరియు సైటోప్లాజంలోని రైబోజోమ్-రిచ్ ప్రాంతాలుఎరుపు రంగు.

బి) న్యూక్లియస్ యొక్క ఇతర నిర్మాణాలు (న్యూక్లియోలితో పాటు) -ఆకుపచ్చ .

3. సాధారణంగా ఒక నియంత్రణ తయారీ కూడా చేయబడుతుంది, ఇది రంజనం ముందు రిబోన్యూక్లీస్తో చికిత్స చేయబడుతుంది.

1b) DNA

Feulgen యొక్క ప్రతిచర్య.

1. ప్రధాన కారకం ఫుచ్సినస్ యాసిడ్ (షిఫ్స్ రియాజెంట్).

2. DNA-కలిగిన నిర్మాణాలులో పెయింట్ చేయబడ్డాయిఊదా-ఎరుపు రంగు.

2. ప్రోటీన్లు

వివిధ ప్రతిచర్యలు ఉపయోగించబడతాయి; సహా:

a) బ్రోమోఫెనాల్ బ్లూతో (ప్రోటీన్ల కోసం -ముదురు ఊదా రంగు); బి) నిన్‌హైడ్రిన్-షిఫ్ రియాజెంట్ మిశ్రమంతో (ప్రోటీన్లు పొందుతాయిఎరుపు రంగు).

3a) పాలీశాకరైడ్లు

CHIC ప్రతిచర్య.

1. కారకం -iff-పర్మరియునేనొక్కడినేకుఇస్లోటా (హైలైట్ చేయబడిన అక్షరాలు సంక్షిప్తీకరణను కలిగి ఉంటాయిCHIC).

2. పీరియడేట్ సబ్‌స్ట్రేట్‌లో ఆల్డిహైడ్ సమూహం ఏర్పడటాన్ని ప్రోత్సహిస్తుంది, ఇది షిఫ్ రియాజెంట్‌తో సంకర్షణ చెందుతుంది.

3. తయారీలో, PHIK-పాజిటివ్ భాగాలు (ఉదాహరణకు, గ్లైకోజెన్ గ్రాన్యూల్స్) కలిగి ఉంటాయిముదురు ఎరుపు రంగు.

3b) గ్లైకోసమైన్ గ్లైకాన్స్

టోలుయిడిన్ బ్లూతో ప్రతిచర్య.

1. టోలుడిన్ బ్లూ అనేక ఆమ్ల సమూహాలను కలిగి ఉన్న పదార్ధాలతో సంకర్షణ చేసినప్పుడు,మెటాక్రోమాసియా

- నుండి రంగు మార్పునీలంపైఊదామరియుఎరుపు.

2. సారూప్యమైన ఆస్తిని ప్రత్యేకించి, నిరాకార పదార్ధం యొక్క భాగాలు కలిగి ఉంటాయి బంధన కణజాలము- గ్లైకోసమినోగ్లైకాన్స్

(ఇది తెలిసినట్లుగా,హెటెరోపాలిసాకరైడ్లుయాసిడ్ రాడికల్స్ యొక్క అధిక కంటెంట్తో).

4. తటస్థ కొవ్వు

సుడాన్ IIIతో ప్రతిచర్య (ఇది ఇప్పటికే ప్రస్తావించబడింది).

కొవ్వు కణంలోని కొవ్వు చుక్కలు ప్రకాశవంతంగా పెయింట్ చేయబడతాయినారింజ-ఎరుపు రంగువాటిలో రంగు కరిగిపోవడం వల్ల.

హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ సన్నాహాలను మరక కోసం సుమారు పథకం

1. పారాఫిన్ లేదా ఘనీభవించిన విభాగాలు నీటికి తీసుకురాబడతాయి.

2. హెమటాక్సిలిన్తో రంజనం - 3-5 నిమిషాలలోపు.

3. నీటిలో శుభ్రం చేయు - 2 నిమిషాలు.

4. హైడ్రోక్లోరిక్ యాసిడ్ (70% ఆల్కహాల్‌లో హైడ్రోక్లోరిక్ యాసిడ్ యొక్క 1% ద్రావణం), అనేక సెకన్లు, ఆల్కలీన్ వాటర్‌తో (సుమారు 1 నిమిషం) పునరుద్ధరణతో ఆల్కహాల్ ఆమ్లీకరణలో వ్యత్యాసం. ఈ దశ కావాల్సినది, కానీ అవసరం లేదు.

5. నడుస్తున్న నీటిలో శుభ్రం చేయు.

6. స్వేదనజలంతో శుభ్రం చేసుకోండి.

7. 1% ఇయోసిన్తో రంజనం - 1-2 నిమిషాలు.

8. స్వేదనజలంతో శుభ్రం చేసుకోండి.

9. ఆల్కహాల్ లో డీహైడ్రేషన్ - 2 నిమిషాలు.

10. జిలీన్‌లో క్లియరింగ్ - 2 నిమిషాలు.

11. విభాగం యొక్క ముగింపు - బాల్సమ్ యొక్క డ్రాప్, ఒక కవర్ గాజు.

హిస్టాలజీ మరియు సైటోలజీలో పరిశోధన పద్ధతులు

హిస్టాలజీలో పరిశోధన పద్ధతులలో హిస్టోలాజికల్ సన్నాహాల తయారీ మరియు సూక్ష్మదర్శినిని ఉపయోగించి వాటి అధ్యయనం ఉన్నాయి.

హిస్టోలాజికల్ పరీక్ష యొక్క ప్రధాన పద్ధతి లైట్ మైక్రోస్కోపీ, వీటిలో రకాలు:

- దశ కాంట్రాస్ట్ మైక్రోస్కోపీ- కిరణాలు సాంద్రతలో భిన్నంగా ఉండే అధ్యయనం చేయబడిన వస్తువు యొక్క నిర్మాణాల గుండా వెళుతున్నప్పుడు కాంతి తరంగాల దశ మార్పుపై ఆధారపడి ఉంటుంది, ఇది ఈ నిర్మాణాల విరుద్ధంగా పెరుగుదలకు దారితీస్తుంది మరియు అస్థిరమైన మరియు జీవన కణాలను పరిశీలించడం సాధ్యం చేస్తుంది;

- జోక్యం సూక్ష్మదర్శిని- కాంతి కిరణాల యొక్క వివిధ మార్గాల ఆధారంగా, ఇది ఒక వస్తువు యొక్క చిత్రాన్ని ఇస్తుంది, దీని ద్వారా కణంలోని వివిధ పదార్ధాల ఏకాగ్రతను నిర్ధారించవచ్చు;

- ధ్రువణ సూక్ష్మదర్శిని- సెల్యులార్ నిర్మాణాల బైర్‌ఫ్రింగెన్స్ ఆధారంగా, ఇతర పరిశోధనా పద్ధతులతో (ఉదాహరణకు, మైయోఫిబ్రిల్స్) కనిపించని స్పైరల్ నిర్మాణాలు లేదా నిర్మాణాలను అధ్యయనం చేయడం సాధ్యపడుతుంది;

- ప్రకాశం (ఫ్లోరోసెన్స్) మైక్రోస్కోపీ- షార్ట్-వేవ్ కిరణాలకు గురైనప్పుడు కొన్ని పదార్ధాల గ్లో యొక్క దృగ్విషయం మీద ఆధారపడి ఉంటుంది, ఇది న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలు మరియు కణాలలోని కొన్ని ప్రోటీన్ల కంటెంట్‌ను అధ్యయనం చేయడం సాధ్యపడుతుంది, అయితే సన్నాహాలు ప్రత్యేక రంగులతో ముందే తడిసినవి - ఫ్లోరోక్రోమ్‌లు;

- అతినీలలోహిత సూక్ష్మదర్శిని- వస్తువును ప్రకాశవంతం చేయడానికి స్పెక్ట్రం యొక్క అతినీలలోహిత భాగాన్ని ఉపయోగించడంపై ఆధారపడి ఉంటుంది.

సూక్ష్మంగా అధ్యయనం చేయడానికి అంతర్గత నిర్మాణంకణాలు మరియు ఇంటర్ సెల్యులార్ నిర్మాణాలు (అల్ట్రాస్ట్రక్చర్స్) ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీని ఉపయోగిస్తాయి.

కణాలలో వివిధ రసాయన సమ్మేళనాలను గుర్తించడానికి (అమైనో ఆమ్లాలు, ప్రోటీన్లు, కొవ్వులు, కార్బోహైడ్రేట్లు, ఖనిజాలుమొదలైనవి) అధ్యయనం చేయవలసిన కణంలోని రసాయన సమ్మేళనాలకు మాత్రమే ఎంపిక చేసుకునే రంగుల వాడకంపై ఆధారపడిన హిస్టోకెమికల్ పరిశోధన పద్ధతులను ఉపయోగించండి మరియు వాటిని కనిపించేలా చేయండి.

ఆటోరాడియోగ్రఫీ పద్ధతి, సంబంధిత నిర్మాణాలలో చేర్చబడిన ఐసోటోప్‌ల కణంలోకి ప్రవేశపెట్టడం ఆధారంగా (ఉదాహరణకు, థైమిడిన్ లేబుల్ DNA ను సంశ్లేషణ చేసే కణాల కేంద్రకాలలో చేర్చబడుతుంది), కణజాలాలలో సింథటిక్ ప్రక్రియల కోర్సును అధ్యయనం చేయడానికి ఉపయోగించబడుతుంది.

కణాల విస్తరణ మరియు భేదం యొక్క విధానాలను అధ్యయనం చేయడానికి, వివిధ ప్రభావాలకు వారి ప్రతిస్పందన, సెల్ మరియు కణజాల సంస్కృతి పద్ధతి ఉపయోగించబడుతుంది, ఇది కృత్రిమ పోషక మాధ్యమంలో శరీరం వెలుపల వివిధ కణాలను పెంచడంపై ఆధారపడి ఉంటుంది.

ఒకటి ఆధునిక పద్ధతులుహిస్టాలజీలో ఉపయోగించబడుతుంది కన్ఫోకల్ మైక్రోస్కోపీ, ఇది ప్రత్యేక కంప్యూటర్ ప్రోగ్రామ్‌లను ఉపయోగించి అధ్యయనంలో ఉన్న వస్తువు యొక్క త్రిమితీయ చిత్రాన్ని పొందేందుకు మిమ్మల్ని అనుమతిస్తుంది.

హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్‌తో తడిసిన మానవ ఊపిరితిత్తుల కణజాలం యొక్క హిస్టోలాజికల్ నమూనా.

హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్(హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్) అనేది హిస్టాలజీలో అత్యంత సాధారణ స్టెయినింగ్ పద్ధతుల్లో ఒకటి. మెడికల్ డయాగ్నస్టిక్స్‌లో విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతుంది, ముఖ్యంగా బయాప్సీ ద్వారా పొందిన కణజాలం మరక కోసం ఆంకాలజీలో.

స్టెయినింగ్ అనేది ప్రాథమిక రంగు హెమటాక్సిలిన్‌ను ఉపయోగించడం, ఇది ప్రకాశవంతమైన నీలం రంగులో బాసోఫిలిక్ కణ నిర్మాణాలను మరక చేస్తుంది మరియు ఆల్కహాలిక్ యాసిడ్ డై ఇయోసిన్ Y, ఇది ఎరుపు-గులాబీ రంగులో ఇసినోఫిలిక్ కణ నిర్మాణాలను మరక చేస్తుంది. బాసోఫిలిక్ నిర్మాణాలు సాధారణంగా న్యూక్లియిక్ ఆమ్లాలను (DNA మరియు RNA) కలిగి ఉంటాయి: కణ కేంద్రకం, రైబోజోమ్‌లు మరియు సైటోప్లాజం యొక్క RNA అధికంగా ఉండే ప్రాంతాలు. ఇసినోఫిలిక్ నిర్మాణాలు లెవీ బాడీస్ వంటి ఇంట్రా- మరియు ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ ప్రోటీన్‌లను కలిగి ఉంటాయి. సైటోప్లాజమ్ అనేది ఇసినోఫిలిక్ వాతావరణం. ఎర్ర రక్త కణాలు ఎల్లప్పుడూ ప్రకాశవంతమైన ఎరుపు రంగులో ఉంటాయి.

హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్ టెక్నిక్

  1. ఆర్థో-జిలీన్ లేదా టోల్యూన్‌లోని విభాగాల నుండి పారాఫిన్‌ను తీసివేసి, అవరోహణ ఏకాగ్రతతో కూడిన ఆల్కహాల్‌లను దాటి నీళ్లలోకి తీసుకురండి (జిలీన్ లేదా టోలున్ యొక్క రెండు భాగాలు - 3-5 నిమిషాలు, 96° ఇథనాల్ - 3 నిమిషాలు, 80° ఇథనాల్ - 3 నిమిషాలు, 70° ఇథనాల్ - 3 నిమిషాలు, స్వేదనజలం - 5 నిమిషాలు).
  2. 7-10 నిమిషాలు హెమటాక్సిలిన్‌తో స్టెయిన్ చేయండి (డై యొక్క పరిపక్వతను బట్టి).
  3. 5 నిమిషాలు స్వేదనజలంలో శుభ్రం చేసుకోండి.
  4. 70° ఇథనాల్‌లో 1% హైడ్రోక్లోరిక్ యాసిడ్‌లో విభాగాలు గోధుమ రంగులోకి మారే వరకు వేరు చేయండి.
  5. స్వేదనజలంతో కడగండి మరియు విభాగాలు నీలం రంగులోకి వచ్చే వరకు బలహీనమైన (0.5%) అమ్మోనియా ద్రావణంతో కడగాలి.
  6. రంగు సజల ద్రావణంలో eosin 0.5-1 నిమిషం (కావలసిన రంగుపై ఆధారపడి).
  7. అదనపు ఇయోసిన్ తొలగించడానికి స్వేదనజలం యొక్క మూడు భాగాలలో కడగాలి.
  8. 70° ఇథనాల్‌లో ఒక భాగం, 96° ఇథనాల్‌లో రెండు భాగాలుగా ఉన్న విభాగాల నుండి నీటిని తీసివేయండి. ఆల్కహాల్ యొక్క ప్రతి భాగంలో ఎక్స్పోజర్ 2 నిమిషాలు.
  9. విభాగాలు కార్బోలిక్ జిలీన్ (1:4 లేదా 1:5 నిష్పత్తిలో కరిగిన ఫినాల్ మరియు జిలీన్ లేదా టోలున్ మిశ్రమం) - 1 నిమిషంలో రెండు భాగాలలో క్లియర్ చేయబడతాయి.
  10. xylene లేదా toluene యొక్క రెండు భాగాలలో విభాగాలు చివరకు డీహైడ్రేట్ చేయబడతాయి. ముక్కల రాక 2 నిమిషాలు.
  11. హిస్టోలాజికల్ విభాగాలను మౌంట్ చేయడానికి కెనడా బాల్సమ్ లేదా సింథటిక్ మాధ్యమంలో విభాగాలను పొందుపరచండి.

కొన్ని నిర్మాణాలు హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ (సాధారణంగా హైడ్రోఫోబిక్)తో పేలవంగా మరక చేస్తాయి మరియు ఇతర మరక పద్ధతులు అవసరం. ఉదాహరణకు, లిపిడ్లు మరియు మైలిన్ అధికంగా ఉన్న కణాల ప్రాంతాలు అస్పష్టంగా ఉంటాయి: అడిపోసైట్లు, న్యూరానల్ ఆక్సాన్‌ల మైలిన్ కోశం, గొల్గి ఉపకరణం యొక్క పొర మొదలైనవి.

ఇది కూడ చూడు

లింకులు

  • రోసెన్ ల్యాబ్, మాలిక్యులర్ అండ్ సెల్యులార్ బయాలజీ విభాగం, బేలర్ కాలేజ్ ఆఫ్ మెడిసిన్) స్టెప్ బై స్టెప్ ప్రోటోకాల్

వికీమీడియా ఫౌండేషన్. 2010.

ఇతర నిఘంటువులలో "హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్" ఏమిటో చూడండి:

    మానవ ఊపిరితిత్తుల కణజాలం యొక్క హిస్టోలాజికల్ నమూనా, హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్‌తో తడిసినది. హెమటాక్సిలిన్-ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్ (హెమటాక్సిలిన్ మరియు ఇయోసిన్ స్టెయినింగ్) అనేది అత్యంత సాధారణ హిస్టాలజీ పద్ధతుల్లో ఒకటి. వైద్యరంగంలో విస్తృతంగా ఉపయోగించబడుతుంది... ... వికీపీడియా

    శ్వాసకోశ క్షయవ్యాధి. శ్వాసకోశ అవయవాలు చాలా తరచుగా క్షయవ్యాధి (శ్వాసకోశ క్షయవ్యాధి) ద్వారా ప్రభావితమవుతాయి. మన దేశంలో ఆమోదించబడిన క్షయవ్యాధి యొక్క క్లినికల్ వర్గీకరణకు అనుగుణంగా, క్షయవ్యాధి యొక్క క్రింది రూపాలు ప్రత్యేకించబడ్డాయి. డి.: ప్రాథమిక... ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    ఐ హార్ట్ గుండె (లాటిన్ కోర్, గ్రీక్ కార్డియా) అనేది ఒక బోలు ఫైబ్రోమస్కులర్ అవయవం, ఇది పంపు వలె పనిచేస్తుంది, ప్రసరణ వ్యవస్థలో రక్తం యొక్క కదలికను నిర్ధారిస్తుంది. అనాటమీ గుండె పెరికార్డియంలోని పూర్వ మెడియాస్టినమ్ (మీడియాస్టినమ్)లో ఉంది... ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    - (leucoscs; గ్రీక్ ల్యుకోస్ వైట్ + ōsis; పర్యాయపదం లుకేమియా) సాధారణ హెమటోపోయిటిక్ జెర్మ్స్ స్థానభ్రంశంతో సంభవించే కణితి స్వభావం యొక్క వ్యాధులు: ఎముక మజ్జలోని హెమటోపోయిటిక్ కణాల నుండి కణితి పుడుతుంది. L. సంభవం వేర్వేరుగా ఒకే విధంగా ఉండదు... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    I న్యుమోనియా (న్యుమోనియా; గ్రీక్ న్యుమోన్ ఊపిరితిత్తులు) అనేది ఊపిరితిత్తుల కణజాలం యొక్క అంటువ్యాధి, ఇది ఆల్వియోలీ యొక్క తప్పనిసరి ప్రమేయంతో ఊపిరితిత్తుల యొక్క అన్ని నిర్మాణాలను ప్రభావితం చేస్తుంది. ఊపిరితిత్తుల కణజాలంలో నాన్-ఇన్ఫెక్షన్ ఇన్ఫ్లమేటరీ ప్రక్రియలు హానికరమైన... ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    ఎక్స్‌ట్రాపల్మోనరీ ట్యూబర్‌క్యులోసిస్ అనేది ఊపిరితిత్తులు మరియు ఇతర శ్వాసకోశ అవయవాలు మినహా ఏదైనా స్థానికీకరణ యొక్క క్షయవ్యాధి రూపాలను ఏకం చేసే షరతులతో కూడిన భావన. మన దేశంలో స్వీకరించబడిన క్షయవ్యాధి (TB) యొక్క క్లినికల్ వర్గీకరణకు అనుగుణంగా, T.v. చేర్చండి...... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    I ప్లాసెంటా (lat. ప్లాసెంటా కేక్; పర్యాయపదం పిల్లల స్థలం) గర్భధారణ సమయంలో గర్భాశయ కుహరంలో అభివృద్ధి చెందే అవయవం మరియు తల్లి శరీరం మరియు పిండం మధ్య కమ్యూనికేట్ చేస్తుంది. మావిలో సంక్లిష్ట జీవ ప్రక్రియలు జరుగుతాయి, అందించడం... ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    I రెట్రోపెరిటోనియల్ స్పేస్ (స్పేషియం రెట్రోపెరిటోనియల్; పర్యాయపదం రెట్రోపెరిటోనియల్ స్పేస్) ప్యారిటల్ పెరిటోనియం యొక్క వెనుక భాగం మరియు ఇంట్రా-అబ్డామినల్ ఫాసియా మధ్య ఉన్న సెల్యులార్ స్పేస్; డయాఫ్రాగమ్ నుండి చిన్న పెల్విస్ వరకు విస్తరించి ఉంటుంది. IN… మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    I గర్భాశయం గర్భాశయం (గర్భాశయం, మెట్రా) అనేది జతకాని కండరాల బోలు అవయవం, దీనిలో పిండం యొక్క అమరిక మరియు అభివృద్ధి జరుగుతుంది; మహిళ యొక్క కటి కుహరంలో ఉంది. పిండం పొడవు సుమారు 65 మిమీ ఉన్నప్పుడు జనన పూర్వ కాలంలో ఆర్గానోజెనిసిస్ M. అభివృద్ధి ప్రారంభమవుతుంది ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా

    I కఫం (కఫం) అనేది నాసికా శ్లేష్మం మరియు పారానాసల్ సైనస్‌ల నుండి లాలాజలం మరియు స్రావం యొక్క మిశ్రమంతో నిరీక్షణ సమయంలో విడుదలయ్యే రోగలక్షణంగా మార్చబడిన ట్రాకియోబ్రోన్చియల్ స్రావం. సాధారణంగా, ట్రాకియోబ్రోన్చియల్ స్రావం శ్లేష్మం,... ... మెడికల్ ఎన్సైక్లోపీడియా



ప్రశ్నలు ఉన్నాయా?

అక్షర దోషాన్ని నివేదించండి

మా ఎడిటర్‌లకు పంపబడే వచనం: