Ιστολογική τεχνική. Μέθοδοι και τεχνικές μικροσκοπίας

Η σημασία της επιστήμης στη ζωή ολόκληρης της κοινωνίας είναι πολύ δύσκολο να αμφισβητηθεί. Οι επιστήμονες και οι εξελίξεις τους έδωσαν στην κοινωνία όλα όσα χρησιμοποιεί τώρα και απολαμβάνει με χαρά. Οι εξελίξεις των επιστημόνων σε διάφορους τομείς καθιστούν δυνατή την καταπολέμηση των θανατηφόρων ασθενειών, την καταπολέμηση ψυχικών διαταραχών, τη δημιουργία μοναδικού «έξυπνου» εξοπλισμού, ακόμη και ρομπότ. Οι δυνατότητες της επιστήμης είναι πραγματικά ατελείωτες. Τα νέα πρόσωπα φέρνουν πάντα μαζί τους νέες ιδέες, που γίνονται η βάση για μελλοντικές εξελίξεις. Ωστόσο, πολλές εξελίξεις βασίζονται σε απλές και δοκιμασμένες μεθόδους.

Πολλοί σοφοί του παρελθόντος είπαν ότι υπάρχει μακρο- και μικρόκοσμος. Σε εκείνο το στάδιο ανάπτυξης, οι άνθρωποι δεν μπορούσαν να κατανοήσουν το πλήρες βάθος αυτών των λέξεων. Εξάλλου, ο μακρο- και ο μικρόκοσμος υπάρχουν πραγματικά και αλληλεπιδρούν πολύ στενά. Μπορούν να προκληθούν μικροσκοπικές αλλαγές στη δομή των κυττάρων παγκόσμιες αλλαγές V ηλιακό σύστημα. Σήμερα είναι πολύ δύσκολο να αποδειχθεί ή να διαψευσθεί μια τέτοια σχέση, αλλά μελέτες του κόσμου των βακτηρίων και των κυττάρων δείχνουν ότι ένα κύτταρο είναι ένα μικρό Σύμπαν.

Μικροσκοπία

Η μικροσκοπία είναι η επιστήμη της χρήσης μικροσκοπίου. Μετάφραση από τα ελληνικά, αυτή η λέξη σημαίνει «μικρό, μικρό». Η μικροσκοπία μπορεί να χωριστεί σε διάφορους υποτύπους: οπτική, πολυφωτονική, ακτινογραφία, λέιζερ και ηλεκτρονική. Σκοπός αυτής της μεθόδου έρευνας είναι η αυξημένη παρατήρηση του αντικειμένου και η καταγραφή των παρατηρούμενων αλλαγών.

Ιστορία του μικροσκοπίου

Στην αρχή του ιστορική εξέλιξημικροσκόπια ήταν αυτά που χρησιμοποιούσαν ακτίνες ορατού φωτός. Τέτοια όργανα ήταν πολύ αδύναμα για παρατήρηση και ήταν κατάλληλα μόνο για απλές λειτουργίες. Η ιδέα ενός ηλεκτρονικού μικροσκοπίου προέκυψε τη στιγμή που οι επιστήμονες σκέφτηκαν να αντικαταστήσουν ηλεκτρομαγνητική ακτινοβολίασε μια δέσμη ηλεκτρονίων. Αυτό το γεγονός σηματοδότησε την ανάπτυξη του ηλεκτρονικού μικροσκοπίου, το οποίο επέκτεινε σημαντικά τις δυνατότητες παρατήρησης ενός αντικειμένου.

Μέθοδοι μικροσκοπίας

Για να εξετάσετε σωστά και διεξοδικά οποιοδήποτε αντικείμενο, είναι απαραίτητο να εργαστείτε σύμφωνα με έναν συγκεκριμένο αλγόριθμο. Τέτοιοι αλγόριθμοι αναπτύσσονται μία φορά και χρησιμοποιούνται για χρόνια. Για να μελετήσει ο κόσμοςχρησιμοποιώντας ειδικό εξοπλισμό, είναι απαραίτητο να κυριαρχήσετε ειδικές μεθόδους. Οι μέθοδοι μικροσκοπίας είναι ένα σύνολο διαφόρων αλγορίθμων, ακολουθώντας τους οποίους μπορείτε να μελετήσετε διεξοδικά και συστηματικά ένα συγκεκριμένο αντικείμενο του μικροκόσμου. Το πέρασμα μιας δέσμης φωτός από μικροσκόπιο συνοδεύεται από κάποιες αλλαγές στα αρχικά χαρακτηριστικά που μπορεί να προκληθούν δομική δομήθέμα. Αυτή η διαδικασία μπορεί να συνοδεύεται από μια σειρά από οπτικά εφέ, όπως ανάκλαση, απορρόφηση, διάθλαση, διασπορά κ.λπ.

Μέθοδοι μικροσκοπίας φωτός

Το μικροσκόπιο φωτός είναι ένα σύστημα τεχνικών που χρησιμοποιούν διάφορα οπτικά εφέ για την αξιόπιστη εμφάνιση των αποτελεσμάτων. Τα ορατά στοιχεία και η φύση της εικόνας που προκύπτει θα εξαρτηθούν σε μεγάλο βαθμό από τον φωτισμό. Συνολικά υπάρχουν ένας μεγάλος αριθμός απόμέθοδοι μικροσκοπίας: φωτεινό πεδίο, λοξός φωτισμός, αντίθεση παρεμβολής, σκοτεινό πεδίο, μέθοδος πόλωσης, αντίθεση φάσης, υπεριώδης, φθορισμός, υπέρυθρη μικροσκοπία, ομοεστιακό μικροσκόπιο.

Όλες αυτές οι μέθοδοι έχουν ορισμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Όταν εργάζεστε με ένα δείγμα, θα πρέπει να επιλέγεται μία ή άλλη μέθοδος με βάση την επάρκειά της σε μια δεδομένη κατάσταση. Δυνατό και αδύναμες πλευρέςγια κάθε μέθοδο δεν είναι γενικά σημαντικές, το κυριότερο είναι ότι η μέθοδος είναι εφαρμόσιμη υπό τις δεδομένες συνθήκες.

Μικροσκοπία και ιατρική

Η χρήση της μικροσκοπίας στην ιατρική έχει τεράστιες δυνατότητες. Σήμερα, χάρη στα μικροσκόπια, είναι δυνατή η εξέταση διαφόρων κυττάρων του ανθρώπινου σώματος προκειμένου να προσδιοριστεί με ακρίβεια η κατάσταση της υγείας. Τα κύτταρα του σώματος δίνουν το πιο ακριβές και αξιόπιστο αποτέλεσμα, το οποίο μέχρι πρόσφατα ήταν αδύνατο να επιτευχθεί, αφού τα μικροσκόπια δεν μπορούσαν να δώσουν ολοκληρωμένες πληροφορίες.

Η χρήση τέτοιων συσκευών είναι πολλά υποσχόμενη, επειδή οι μέθοδοι θεραπείας και διάγνωσης μπορούν να αλλάξουν δραματικά και να μεταβούν πλήρως σε νέο επίπεδο. Η έρευνα που χρησιμοποιεί μικροσκόπια είναι γνωστή και χρησιμοποιείται εδώ και πολύ καιρό, αλλά η επιστήμη βρίσκεται στο κατώφλι της θεραπείας των ανθρώπων με κύτταρα. Αυτή είναι μια μοναδική ευκαιρία που θα σας επιτρέψει να απομακρυνθείτε από τις συμβατικές μεθόδους θεραπείας και να ξεχάσετε τα φάρμακα. Το κύτταρο είναι το πιο ισχυρό στοιχείο του σώματος. Είναι απλώς άσκοπο να μιλάμε για τα οφέλη που μπορεί να αποφέρει μια μεταμόσχευση υγιών κυττάρων σε έναν άρρωστο, γιατί είναι προφανές.

Εξέταση ούρων

Μια γενική εξέταση ούρων είναι ένα σύνολο μέτρων που στοχεύουν στη μελέτη των ιδιοτήτων των ούρων και της φυσικοχημικής σύστασής τους. Σημαντικοί δείκτες είναι το χρώμα, η οσμή, η αντίδραση, η διαφάνεια, η πυκνότητα, καθώς και η περιεκτικότητα των ούρων σε διάφορες ουσίες. Η μικροσκόπηση του ιζήματος των ούρων σας επιτρέπει να προσδιορίσετε την παρουσία αλάτων, κυτταρικών στοιχείων και εκμαγείων. Θα πρέπει να γίνει κατανοητό ότι τα ούρα είναι το τελικό προϊόν της νεφρικής δραστηριότητας, το οποίο μπορεί να αντικατοπτρίζει με μεγάλη ακρίβεια την κατάσταση των μεταβολικών διεργασιών και του αίματος στο σώμα.

Ανάλυση ιζήματος ούρων

Η μικροσκοπία ούρων σας επιτρέπει να δημιουργήσετε μια πιο ολοκληρωμένη εικόνα μιας πλήρους εξέτασης του σώματος. Επίσης, ένα επίχρισμα χρησιμοποιείται συχνά για ρουτίνα και διαφορική διάγνωση παθήσεων του ουροποιητικού και των νεφρών. Κατά τη διάρκεια της θεραπείας, μπορεί να παραγγελθεί μικροσκοπία ούρων για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της παρέμβασης του γιατρού. Η εξέταση ούρων μας επιτρέπει να εντοπίσουμε συγκεκριμένα ή πιθανά προβλήματα στην ισορροπία νερού και ηλεκτρολυτών του σώματος, καθώς και στη μεταβολική διαδικασία. Η ανάλυση ούρων είναι πολύ αποτελεσματική στη διάγνωση ασθενειών γαστρεντερικός σωλήνας, καθώς και κατά τη διάρκεια μολυσματικών και φλεγμονωδών διεργασιών στο σώμα. Μερικές φορές η μικροσκοπία ούρων χρησιμοποιείται για την παρακολούθηση της κατάστασης του ασθενούς κατά τη διάρκεια ιατρικής ή χειρουργικής θεραπείας.

Εξέταση αίματος κάτω από μικροσκόπιο

Τα αιμοσφαίρια σχηματίζονται στον κόκκινο μυελό των οστών και στη συνέχεια απελευθερώνονται στην κυκλοφορία του αίματος. Το καθένα εκτελεί τη συγκεκριμένη λειτουργία του. Τα λευκοκύτταρα χρειάζονται για την καταπολέμηση των μολυσματικών κυττάρων, τα ερυθρά αιμοσφαίρια βοηθούν στον εμπλουτισμό των κυττάρων με οξυγόνο και την απομάκρυνση του διοξειδίου του άνθρακα από αυτά, τα αιμοπετάλια είναι πολύ σημαντικά για την αιμόσταση. ΣΕ φυσιολογικές συνθήκεςΤο ανθρώπινο σώμα αναπτύσσει μια κανονιστική αξία για όλα τα κύτταρα, η οποία δεν υπερβαίνει ορισμένα όρια. Εάν παρουσιαστούν οποιεσδήποτε επιπλοκές ή εμφανιστεί ασθένεια, τα αιμοσφαίρια μπορούν να αλλάξουν το μέγεθος, το σχήμα, το χρώμα και τον αριθμό τους. Μόνο με ακριβή μικροσκοπική εξέταση μπορεί να προσδιοριστεί η κατάσταση των κυττάρων και να εξαχθούν τα κατάλληλα συμπεράσματα.

Το αίμα είναι το ζωογόνο υγρό του σώματος, το οποίο εξασφαλίζει την ανταλλαγή χρήσιμων ουσιών μεταξύ όλων των κυττάρων. Η μικροσκοπία επιχρίσματος αίματος είναι μια μελέτη που πραγματοποιείται κάτω από μικροσκόπιο. Το φάρμακο που μελετάται παρασκευάζεται από μία σταγόνα αίματος. Αυτή η διαδικασία περιλαμβάνεται στη γενική εξέταση αίματος ή τη φόρμουλα λευκοκυττάρων και δεν εκτελείται χωριστά.

Μικροσκόπιο επιχρίσματος

Γιατί χρειάζεται Η μικροσκόπηση ενός επιχρίσματος αίματος δίνει στον ειδικό πολύ σημαντικές γνώσεις για την κατάσταση της ανθρώπινης υγείας. Χρησιμοποιώντας αυτή την ανάλυση, είναι δυνατό να προσδιοριστεί η ποσοτική αναλογία ερυθρών αιμοσφαιρίων, αιμοπεταλίων, λευκοκυττάρων, καθώς και το σχήμα και το μέγεθός τους. Επιπλέον, επιτρέπει τον προσδιορισμό της ποσοτικής έκφρασης των ανώριμων λευκοκυττάρων, κάτι που είναι πολύ σημαντικό σημείοσε μια σειρά από ασθένειες. Επίσης, ένα επίχρισμα αίματος σάς επιτρέπει να διαγνώσετε ποιοτικά ασθένειες που μπορεί να σχετίζονται με διαταραχές των λειτουργιών του αίματος, το σχηματισμό, την πήξη και την καταστροφή του. μετά από ακτινοβολία και χημειοθεραπεία, και σε περίπτωση προβλημάτων με την αιμοσφαιρίνη, καθώς και για λευχαιμία.

Ένα επίχρισμα αίματος συνταγογραφείται εάν μια γενική εξέταση αίματος δείξει ότι η ποσοτική έκφραση των λευκοκυττάρων, των ανώριμων ή άτυπων κυττάρων είναι αυξημένη. Για ένα επίχρισμα, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε βιοϋλικό από αίμα ή τριχοειδή αγγεία.

Βιολογία και μικροσκόπια

Η βιολογία διευρύνει πολύ τις δυνατότητες χρήσης μικροσκοπίων. Όπως αναφέρθηκε προηγουμένως, η κυτταρολογία βασίζεται σε μεγάλο βαθμό σε σύγχρονα και ισχυρά μικροσκόπια. Η μικροσκοπία στη βιολογία ανοίγει άνευ προηγουμένου περιθώρια για πειράματα και έρευνα για τους επιστήμονες. Οι σύγχρονες εξελίξεις μας επιτρέπουν να μιλάμε τώρα για το μέλλον που μας περιμένει.

Η μικροσκοπία στη βιολογία έχει πολύ ευρεία εφαρμογή. Οι συσκευές καθιστούν δυνατή τη μελέτη οργανισμών που είναι απρόσιτοι για το ανθρώπινο μάτι, αλλά είναι πολύ σημαντικοί για επιστημονικά πειράματα. Στη βιολογία, η μέθοδος που χρησιμοποιείται συχνότερα είναι η ηλεκτρονική μικροσκοπία, η οποία παράγει μια εικόνα λόγω μιας κατευθυνόμενης ροής ηλεκτρονίων. Επιπλέον, ακόμη και ένα μικροσκόπιο φωτός επιτρέπει σε κάποιον να μελετήσει ζωντανά βιολογικά αντικείμενα.

Η μέθοδος μικροσκοπίας χρησιμοποιείται πολύ ενεργά στη βιολογία, αφού σχεδόν όλες οι ποικιλίες είναι εφαρμόσιμες για βιολογική έρευνα. Το μικροσκόπιο παρεμβολής σάς επιτρέπει να εξετάζετε διαφανή υγρά και αντικείμενα, καθώς και να παρέχετε την ποιοτική τους ανάλυση. Αυτό είναι δυνατό λόγω του γεγονότος ότι η δέσμη φωτός, που διέρχεται από τη συσκευή, διχάζεται: ένα μέρος της διέρχεται από το αντικείμενο και το άλλο περνάει. Έτσι, οι δύο δέσμες παρεμβαίνουν και συνδυάζονται για να παράγουν μια πλήρη εικόνα.

Μικροσκοπία σε διάφορους τομείς εφαρμογής

Το εύρος της μικροσκοπίας είναι πολύ ευρύ. Παρά το γεγονός ότι τα μικροσκόπια προορίζονταν αρχικά για έρευνα στον τομέα της βιολογίας, σήμερα η σφαίρα επιρροής τους έχει επεκταθεί σημαντικά. Η μικροσκοπία είναι ένα σύνολο μεθόδων που έχει βρει την εφαρμογή του στην ανάλυση στερεών και κρυσταλλικών σωμάτων, της δομής και της δομής των επιφανειών. Τα μικροσκόπια χρησιμοποιούνται επίσης ενεργά στην ιατρική όχι μόνο για διαγνωστικά, αλλά και για τη διενέργεια μικροχειρουργικών επεμβάσεων. Επιπλέον, είναι γνωστό ότι οι επιστήμονες έχουν αναπτύξει ένα υποβρύχιο μικροσκόπιο λέιζερ, σκοπός του οποίου είναι η αναζήτηση εξωγήινης ζωής στην Ευρώπη.

Δεν πρέπει επίσης να ξεχνάμε την ταχεία ανάπτυξη της νανοτεχνολογίας, η οποία είναι αδιανόητη χωρίς μικροσκόπια. Η ανάπτυξη αυτής της βιομηχανίας οδηγεί στο γεγονός ότι οι τύποι μικροσυσκευών βελτιώνονται συνεχώς. Επιπλέον, εμφανίζονται νέα που έχουν σχεδιαστεί για να μελετήσουν ένα συγκεκριμένο περιβάλλον.

Συνοψίζοντας, πρέπει να πούμε ότι η μικροσκοπία είναι ένας πολλά υποσχόμενος τομέας που αναπτύσσεται όλο και πιο ενεργά κάθε χρόνο. Το ενδιαφέρον για τα ανθρώπινα βλαστοκύτταρα, καθώς και η ανάπτυξη της νανοτεχνολογίας, οδηγεί στο γεγονός ότι τα μικροσκόπια γίνονται αναπόσπαστο μέρος κάθε ερευνητικής εργασίας.

Τα μικροσκόπια χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση και τη μελέτη μικροοργανισμών. Τα μικροσκόπια φωτός έχουν σχεδιαστεί για τη μελέτη μικροοργανισμών με μέγεθος τουλάχιστον 0,2 microns (βακτήρια, πρωτόζωα κ.λπ.) και τα ηλεκτρονικά μικροσκόπια έχουν σχεδιαστεί για τη μελέτη μικρότερων μικροοργανισμών (ιούς) και τις μικρότερες δομές βακτηρίων.
Μοντέρνο μικροσκόπια φωτός- πρόκειται για πολύπλοκα οπτικά όργανα, ο χειρισμός των οποίων απαιτεί ορισμένες γνώσεις, δεξιότητες και μεγάλη προσοχή.
Τα μικροσκόπια φωτός χωρίζονται σε μαθητή, εργασία, εργαστήριο και έρευνα, που διαφέρουν ως προς το σχεδιασμό και την οπτική. Τα οικιακά μικροσκόπια (Biolam, Bimam, Mikmed) έχουν ονομασίες που υποδεικνύουν σε ποια ομάδα ανήκουν (S - student, R - εργαζόμενοι, L - εργαστήριο, I - έρευνα), ο εξοπλισμός υποδεικνύεται με έναν αριθμό.

Ένα μικροσκόπιο έχει μηχανικά και οπτικά μέρη.
ΠΡΟΣ ΤΗΝ μηχανικό μέροςπεριλαμβάνουν: ένα τρίποδο (αποτελούμενο από μια βάση και ένα στήριγμα σωλήνα) και έναν σωλήνα τοποθετημένο σε αυτό με ένα περίστροφο για την προσάρτηση και την αλλαγή φακών, ένα στάδιο για την προετοιμασία, συσκευές για τη σύνδεση συμπυκνωτή και φίλτρα φωτός, καθώς και μηχανισμούς ενσωματωμένους το τρίποδο για χοντρό (μακρομηχανισμός, μακροβίδα) και ψιλό
(μικρομηχανισμός, μικροβίδα) που κινεί τη βάση αντικειμένου ή τη θήκη σωλήνα.
Οπτικό μέροςΤο μικροσκόπιο αντιπροσωπεύεται από αντικείμενα, προσοφθάλμιους φακούς και ένα σύστημα φωτισμού, το οποίο με τη σειρά του αποτελείται από έναν συμπυκνωτή Abbe που βρίσκεται κάτω από τη σκηνή, έναν καθρέφτη με επίπεδη και κοίλη πλευρά, καθώς και έναν ξεχωριστό ή ενσωματωμένο φωτισμό. Οι φακοί βιδώνονται στο περίστροφο και ο αντίστοιχος προσοφθάλμιος φακός, μέσω του οποίου παρατηρείται η εικόνα, τοποθετείται στην αντίθετη πλευρά του σωλήνα. Υπάρχουν μονόφθαλμοι (με έναν προσοφθάλμιο φακό) και διόφθαλμοι (με δύο ίδιους προσοφθάλμιους φακούς) σωλήνες.

Σχηματικό διάγραμμα μικροσκοπίου και συστήματος φωτισμού

1. Πηγή φωτός.
2. Συλλέκτης;
3. Διάφραγμα πεδίου ίριδας.
4. Καθρέφτης;
5. Διάφραγμα ανοίγματος ίριδας.
6. Συμπυκνωτής.
7. Ναρκωτικό?
7". Μεγεθυμένη πραγματική ενδιάμεση εικόνα του παρασκευάσματος, που σχηματίζεται από: φακός;
7"". Μεγεθυμένη εικονική τελική εικόνα του δείγματος όπως φαίνεται μέσα από τον προσοφθάλμιο φακό.
8. Φακός;
9. Εικονίδιο εξόδου φακού.
10. Διάφραγμα πεδίου του προσοφθάλμιου φακού.
11. Προσοφθάλμιος φακός.
12. Μάτι.

Ο κύριος ρόλος στη λήψη μιας εικόνας παίζεται από φακός. Δημιουργεί μια μεγεθυμένη, πραγματική και ανεστραμμένη εικόνα ενός αντικειμένου. Αυτή η εικόνα στη συνέχεια μεγεθύνεται περαιτέρω όταν προβάλλεται μέσω ενός προσοφθάλμιου φακού, το οποίο, παρόμοιο με έναν κανονικό μεγεθυντικό φακό, παράγει μια μεγεθυμένη εικονική εικόνα.
ΑυξάνουνΗ κατά προσέγγιση μεγέθυνση ενός μικροσκοπίου μπορεί να προσδιοριστεί πολλαπλασιάζοντας τη μεγέθυνση του αντικειμενικού φακού με τη μεγέθυνση του προσοφθάλμιου φακού. Ωστόσο, η μεγέθυνση δεν καθορίζει την ποιότητα της εικόνας. Καθορίζεται η ποιότητα της εικόνας, η καθαρότητά της ανάλυση μικροσκοπίου, δηλ. τη δυνατότητα διαχωρισμού δύο κοντινών σημείων. Όριο ανάλυσης- η ελάχιστη απόσταση στην οποία αυτά τα σημεία εξακολουθούν να είναι ορατά ξεχωριστά - εξαρτάται από το μήκος κύματος του φωτός με το οποίο φωτίζεται το αντικείμενο και το αριθμητικό άνοιγμα του φακού. Το αριθμητικό διάφραγμα, με τη σειρά του, εξαρτάται από το γωνιακό άνοιγμα του αντικειμενικού φακού και τον δείκτη διάθλασης του μέσου που βρίσκεται μεταξύ του μπροστινού φακού του αντικειμενικού φακού και του δείγματος. Το γωνιακό διάφραγμα είναι μέγιστη γωνία, κάτω από το οποίο οι ακτίνες που περνούν μέσα από το αντικείμενο μπορούν να εισέλθουν στον φακό. Όσο μεγαλύτερο είναι το άνοιγμα και όσο πιο κοντά είναι ο δείκτης διάθλασης του μέσου που βρίσκεται μεταξύ του φακού και του δείγματος στον δείκτη διάθλασης του γυαλιού, τόσο μεγαλύτερη είναι η διακριτική ισχύς του φακού. Αν υποθέσουμε ότι το διάφραγμα του συμπυκνωτή είναι ίσο με το διάφραγμα του φακού, τότε ο τύπος ανάλυσης έχει την ακόλουθη μορφή:

όπου R είναι το όριο ανάλυσης. - μήκος κύματος; NA - αριθμητικό διάφραγμα.

Διακρίνω χρήσιμοςΚαι άχρηστοςαυξάνουν. Η χρήσιμη μεγέθυνση είναι συνήθως ίση με το αριθμητικό διάφραγμα του φακού που μεγεθύνεται κατά 500 έως 1000 φορές. Η υψηλότερη οφθαλμική μεγέθυνση δεν αποκαλύπτει νέες λεπτομέρειες και δεν είναι χρήσιμη.
Ανάλογα με το περιβάλλον που βρίσκεται μεταξύ του φακού και του δείγματος, υπάρχουν «στεγνοί» φακοί μικρής και μεσαίας μεγέθυνσης (έως 40 x) και φακοί εμβάπτισης με μέγιστο διάφραγμα και μεγέθυνση (90-100 x). Ένας "ξηρός" φακός είναι ένας φακός με αέρα μεταξύ του μπροστινού φακού και του δείγματος.

Ένα χαρακτηριστικό των φακών εμβάπτισης είναι ότι μεταξύ του μπροστινού φακού ενός τέτοιου φακού και του παρασκευάσματος, τοποθετείται ένα υγρό εμβάπτισης, το οποίο έχει δείκτη διάθλασης ίδιο με το γυαλί (ή κοντά σε αυτό), που αυξάνει το αριθμητικό διάφραγμα και την ανάλυση του φακός. Το απεσταγμένο νερό χρησιμοποιείται ως υγρό εμβάπτισης για τους φακούς εμβάπτισης στο νερό και το λάδι κέδρου ή το ειδικό συνθετικό λάδι εμβάπτισης χρησιμοποιείται για τους φακούς εμβάπτισης λαδιού. Η χρήση συνθετικού λαδιού εμβάπτισης είναι προτιμότερη επειδή οι παράμετροί του είναι τυποποιημένες με μεγαλύτερη ακρίβεια και σε αντίθεση με το λάδι κέδρου, δεν στεγνώνει στην επιφάνεια του μπροστινού φακού του φακού. Για φακούς που λειτουργούν στην υπεριώδη περιοχή του φάσματος, η γλυκερίνη χρησιμοποιείται ως υγρό εμβάπτισης. Σε καμία περίπτωση δεν πρέπει να χρησιμοποιείτε υποκατάστατα για το λάδι εμβάπτισης και, ειδικότερα, το λάδι βαζελίνης.
**Η εικόνα που λαμβάνεται με χρήση φακών έχει διάφορα μειονεκτήματα: σφαιρικές και χρωματικές εκτροπές, καμπυλότητα του πεδίου εικόνας κ.λπ. Σε φακούς που αποτελούνται από πολλούς φακούς, αυτές οι αδυναμίες διορθώνονται στον ένα ή τον άλλο βαθμό. Ανάλογα με το βαθμό διόρθωσης αυτών των ελλείψεων, οι αχρωματικοί φακοί διακρίνονται από τους πιο σύνθετους φακούς απόχρωμα. Αντίστοιχα, οι φακοί στους οποίους διορθώνεται η καμπυλότητα του πεδίου της εικόνας ονομάζονται planchromats και planapochromats. Η χρήση αυτών των φακών παράγει μια ευκρινή εικόνα σε ολόκληρο το οπτικό πεδίο, ενώ η εικόνα που λαμβάνεται με τους συμβατικούς φακούς δεν είναι εξίσου ευκρινής στο κέντρο και στις άκρες του οπτικού πεδίου. Όλα τα χαρακτηριστικά του φακού είναι συνήθως χαραγμένα στο πλαίσιο του: η δική του μεγέθυνση, διάφραγμα, τύπος φακού (APO - apochromat κ.λπ.). Οι φακοί εμβάπτισης στο νερό έχουν την ονομασία VI και έναν λευκό δακτύλιο γύρω από το πλαίσιο στο κάτω μέρος, οι φακοί εμβάπτισης λαδιού έχουν την ονομασία MI και έναν μαύρο δακτύλιο.
Όλοι οι στόχοι έχουν σχεδιαστεί για να λειτουργούν με γυαλί κάλυψης πάχους 0,17 mm.
Το πάχος της καλυπτρίδας επηρεάζει ιδιαίτερα την ποιότητα της εικόνας όταν εργάζεστε με ισχυρά συστήματα στεγνώματος (40 x). Όταν εργάζεστε με αντικειμενικούς φακούς εμβάπτισης, δεν μπορείτε να χρησιμοποιείτε ολισθητήρες καλύμματος πάχους μεγαλύτερου από 0,17 mm, επειδή το πάχος της ολίσθησης κάλυψης μπορεί να είναι μεγαλύτερο από την απόσταση εργασίας του αντικειμενικού φακού και σε αυτήν την περίπτωση, όταν προσπαθείτε να εστιάσετε τον αντικειμενικό φακό στο δείγμα, το μπροστινό μέρος ο φακός του αντικειμενικού φακού μπορεί να καταστραφεί.
Οι προσοφθάλμιοι φακοί αποτελούνται από δύο φακούς και διατίθενται επίσης σε διάφορους τύπους, καθένας από τους οποίους χρησιμοποιείται με έναν συγκεκριμένο τύπο φακού, εξαλείφοντας περαιτέρω τις ατέλειες της εικόνας. Ο τύπος του προσοφθάλμιου φακού και η μεγέθυνση σημειώνονται στο πλαίσιο.
Ο συμπυκνωτής έχει σχεδιαστεί για να εστιάζει το φως από το φωτιστικό στο δείγμα, κατευθυνόμενο από τον καθρέφτη του μικροσκοπίου ή του φωτιστή (στην περίπτωση χρήσης εναέριου ή ενσωματωμένου φωτιστή). Ένα από τα μέρη του συμπυκνωτή είναι το διάφραγμα ανοίγματος, το οποίο είναι σημαντικό για σωστό φωτισμόφάρμακο.
Ο φωτισμός αποτελείται από έναν λαμπτήρα πυρακτώσεως χαμηλής τάσης με ένα παχύ νήμα, έναν μετασχηματιστή, έναν φακό συλλέκτη και ένα διάφραγμα πεδίου, το άνοιγμα του οποίου καθορίζει τη διάμετρο του φωτισμένου πεδίου στο παρασκεύασμα. Ο καθρέφτης κατευθύνει το φως από το φωτιστικό στον συμπυκνωτή. Προκειμένου να διατηρηθεί ο παραλληλισμός των ακτίνων που προέρχονται από το φωτιστικό προς τον συμπυκνωτή, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιείται μόνο η επίπεδη πλευρά του καθρέφτη.

Ρύθμιση φωτισμού και εστίαση του μικροσκοπίου

Η ποιότητα της εικόνας εξαρτάται επίσης σε μεγάλο βαθμό από τον σωστό φωτισμό. Υπάρχουν αρκετές με διάφορους τρόπουςφωτισμός του δείγματος κατά τη μικροσκοπία. Ο πιο συνηθισμένος τρόπος είναι Εγκαταστάσεις φωτισμού Köhlerπου έχει ως εξής:
1) τοποθετήστε το φωτιστικό στον καθρέφτη του μικροσκοπίου.
2) Ανάψτε τη λάμπα φωτισμού και κατευθύνετε το φως στον επίπεδο (!) καθρέφτη του μικροσκοπίου.
3) Τοποθετήστε το παρασκεύασμα στη σκηνή του μικροσκοπίου.
4) καλύψτε τον καθρέφτη του μικροσκοπίου με ένα κομμάτι λευκό χαρτί και εστιάστε την εικόνα του νήματος της λάμπας πάνω του, μετακινώντας την υποδοχή της λάμπας στο φωτιστικό.
5) αφαιρέστε το φύλλο χαρτιού από τον καθρέφτη.
6) κλείστε το διάφραγμα ανοίγματος του συμπυκνωτή. Μετακινώντας τον καθρέφτη και μετακινώντας ελαφρά την υποδοχή της λάμπας, η εικόνα του νήματος εστιάζεται στο διάφραγμα του ανοίγματος. Η απόσταση του φωτιστικού από το μικροσκόπιο πρέπει να είναι τέτοια ώστε η εικόνα του νήματος της λάμπας να είναι ίση με τη διάμετρο του διαφράγματος ανοίγματος του συμπυκνωτή (το διάφραγμα ανοίγματος μπορεί να παρατηρηθεί χρησιμοποιώντας ένα επίπεδο καθρέφτη τοποθετημένο στη δεξιά πλευρά της βάσης του το μικροσκόπιο).
7) ανοίξτε το διάφραγμα ανοίγματος του συμπυκνωτή, μειώστε το άνοιγμα του διαφράγματος πεδίου του φωτιστή και μειώστε σημαντικά την ένταση της λάμπας.
8) σε χαμηλή μεγέθυνση (10x), κοιτάζοντας μέσα από τον προσοφθάλμιο φακό, λαμβάνεται μια ευκρινής εικόνα του παρασκευάσματος.
9) στρέφοντας ελαφρά τον καθρέφτη, η εικόνα του διαφράγματος πεδίου, που μοιάζει με φωτεινό σημείο, μεταφέρεται στο κέντρο του οπτικού πεδίου. Κατεβάζοντας και σηκώνοντας τον συμπυκνωτή, επιτυγχάνεται μια ευκρινή εικόνα των άκρων του διαφράγματος πεδίου στο επίπεδο του παρασκευάσματος (ένα χρωματιστό περίγραμμα μπορεί να είναι ορατό γύρω τους).
10) ανοίξτε το διάφραγμα πεδίου του φωτιστή στις άκρες του οπτικού πεδίου, αυξήστε την ένταση του νήματος της λάμπας και μειώστε ελαφρώς (κατά 1/3) το άνοιγμα του διαφράγματος του ανοίγματος του συμπυκνωτή.
11) Όταν αλλάζετε φακούς, πρέπει να ελέγξετε τις ρυθμίσεις φωτός.
Αφού ολοκληρώσετε τη ρύθμιση του φωτός Köhler, δεν μπορείτε να αλλάξετε τη θέση του συμπυκνωτή και το άνοιγμα του διαφράγματος πεδίου και διαφράγματος. Ο φωτισμός του φαρμάκου μπορεί να ρυθμιστεί μόνο με ουδέτερα φίλτρα ή αλλάζοντας την ένταση της λάμπας χρησιμοποιώντας ρεοστάτη. Το υπερβολικό άνοιγμα του διαφράγματος του ανοίγματος του συμπυκνωτή μπορεί να οδηγήσει σε σημαντική μείωση της αντίθεσης της εικόνας και το ανεπαρκές άνοιγμα μπορεί να οδηγήσει σε σημαντική υποβάθμιση της ποιότητας της εικόνας (εμφάνιση δακτυλίων περίθλασης). Για να ελέγξετε το σωστό άνοιγμα του διαφράγματος του ανοίγματος, είναι απαραίτητο να αφαιρέσετε τον προσοφθάλμιο προσοφθάλμιο φακό και, κοιτάζοντας μέσα στο σωλήνα, να τον ανοίξετε έτσι ώστε να καλύπτει το φωτεινό πεδίο κατά το ένα τρίτο. Για να φωτίσετε σωστά το δείγμα όταν εργάζεστε με φακούς χαμηλής μεγέθυνσης (έως 10x), είναι απαραίτητο να ξεβιδώσετε και να αφαιρέσετε τον επάνω φακό συμπυκνωτή.
Προσοχή! Όταν εργάζεστε με φακούς που παρέχουν υψηλή μεγέθυνση - με ισχυρά συστήματα στεγνώματος (40x) και βύθισης (90x), για να μην καταστρέψετε τον μπροστινό φακό, κατά την εστίαση, χρησιμοποιήστε την ακόλουθη τεχνική: κοιτάζοντας από το πλάι, χαμηλώστε τον φακό με μακροεντολή βιδώστε σχεδόν μέχρι να έρθει σε επαφή με το δείγμα, στη συνέχεια, κοιτάζοντας τον προσοφθάλμιο φακό, χρησιμοποιώντας μια μακροβίδα, ανασηκώστε πολύ αργά τον φακό μέχρι να εμφανιστεί μια εικόνα και χρησιμοποιώντας μια μικροβίδα, πραγματοποιείται η τελική εστίαση του μικροσκοπίου.

Φροντίδα μικροσκοπίου

Όταν εργάζεστε με μικροσκόπιο, μην χρησιμοποιείτε μεγάλη δύναμη. Μην αγγίζετε τις επιφάνειες των φακών, των καθρεπτών και των φίλτρων με τα δάχτυλά σας.
Προστατεύω εσωτερικές επιφάνειεςφακούς, καθώς και το πρίσμα του σωλήνα από τη σκόνη, πρέπει πάντα να αφήνετε τον προσοφθάλμιο φακό μέσα στο σωλήνα. Όταν καθαρίζετε τις εξωτερικές επιφάνειες των φακών, πρέπει να αφαιρέσετε τη σκόνη από αυτές με μια μαλακή βούρτσα, πλυμένη με αιθέρα. Εάν είναι απαραίτητο, σκουπίστε προσεκτικά τις επιφάνειες των φακών με ένα καλά πλυμένο, χωρίς σαπούνι λινό ή καμπρικο πανί, ελαφρά βρεγμένο με καθαρή βενζίνη, αιθέρα ή ένα ειδικό μείγμα για τον καθαρισμό των οπτικών. Δεν συνιστάται να σκουπίζετε τα οπτικά στοιχεία του φακού με ξυλόλιο, καθώς αυτό μπορεί να προκαλέσει τη διάσπασή τους.
Από τους καθρέφτες με εξωτερική ασημοποίηση, μπορείτε να αφαιρέσετε τη σκόνη μόνο φυσώντας τη με μια λαστιχένια λάμπα. Δεν μπορούν να σκουπιστούν. Δεν μπορείτε επίσης να ξεβιδώσετε ή να αποσυναρμολογήσετε τους φακούς μόνοι σας - αυτό θα οδηγήσει στη ζημιά τους. Μετά την ολοκλήρωση των εργασιών στο μικροσκόπιο, είναι απαραίτητο να αφαιρέσετε προσεκτικά το υπόλοιπο λάδι εμβάπτισης από τον μπροστινό αντικειμενικό φακό χρησιμοποιώντας τη μέθοδο που υποδεικνύεται παραπάνω. Στη συνέχεια, χαμηλώστε τη βαθμίδα (ή τον συμπυκνωτή σε μικροσκόπια με σταθερή βαθμίδα) και καλύψτε το μικροσκόπιο με ένα κάλυμμα.
Να σώσω εμφάνισηΤο μικροσκόπιο πρέπει να σκουπίζεται περιοδικά με ένα μαλακό πανί ελαφρά εμποτισμένο σε βαζελίνη χωρίς οξύ και στη συνέχεια με ένα στεγνό, μαλακό, καθαρό πανί.

Εκτός από τη συμβατική μικροσκοπία φωτός, υπάρχουν μέθοδοι μικροσκοπίας που επιτρέπουν τη μελέτη μη χρωματισμένων μικροοργανισμών: αντίθεση φάσης , σκοτεινό πεδίοΚαι φωτοβόλοςμικροσκοπία. Για τη μελέτη μικροοργανισμών και των δομών τους, το μέγεθος των οποίων είναι μικρότερο από την ανάλυση ενός μικροσκοπίου φωτός, χρησιμοποιήστε

στη μικροβιολογία: δομή μικροσκοπίου και βασικές τεχνικές μικροσκοπίας ζώντων μικροοργανισμών

1 Χαρακτηριστικά ΔΙΑΦΟΡΕΤΙΚΟΙ ΤΥΠΟΙμικροσκοπία

2 Σχεδιασμός μικροσκοπίου φωτεινού πεδίου

3 Κανόνες για την εργασία με φακό εμβάπτισης

4 Τεχνικές μικροσκοπίας ζώντων μικροοργανισμών

1 Χαρακτηριστικά διαφορετικών τύπων μικροσκοπίας

Οι κύριοι στόχοι της μικροσκοπίας είναι οι εξής:

Ανίχνευση μικροοργανισμών σε διάφορα υλικά.

Κατά προσέγγιση ταυτοποίηση μικροοργανισμών στο δείγμα.

Μελέτη ορισμένων μορφολογικών χαρακτηριστικών και δομών μικροοργανισμών (π.χ. κάψουλες, μαστίγια κ.λπ.).

Μελέτη χρωματισμένων επιχρισμάτων από αποικίες και καθαρές καλλιέργειες.

Σήμερα το πιο χρησιμοποιούμενο είναι το μικροσκόπιο φωτός.

Μικροσκόπιο φωτόςπαρέχει μεγέθυνση έως και 2-3 χιλιάδες φορές, έγχρωμη και κινούμενη εικόνα ζωντανού αντικειμένου, δυνατότητα μικροσκοπικής λήψης και μακροχρόνιας παρατήρησης του ίδιου αντικειμένου, αξιολόγηση της δυναμικής και της χημείας του. Μια εικόνα σε ένα μικροσκόπιο φωτός σχηματίζεται επειδή ένα αντικείμενο και οι διάφορες δομές του απορροφούν επιλεκτικά φως διαφορετικών μηκών κύματος (αντίθεση απορρόφησης) ή επειδή η φάση ενός φωτεινού κύματος αλλάζει καθώς το φως περνά μέσα από το αντικείμενο (αντίθεση φάσης).

Τα κύρια χαρακτηριστικά κάθε μικροσκοπίου είναι η ανάλυση και η αντίθεση. Ανάλυση- Αυτό ελάχιστη απόσταση, στα οποία υπάρχουν δύο σημεία, που φαίνονται χωριστά από το μικροσκόπιο. Η ανάλυση του ανθρώπινου ματιού στη λειτουργία καλύτερης όρασης είναι 0,2 mm. Αντίθεση εικόναςείναι η διαφορά στη φωτεινότητα μεταξύ της εικόνας και του φόντου. Εάν αυτή η διαφορά είναι μικρότερη από 3–4%, τότε δεν μπορεί να ανιχνευθεί ούτε από το μάτι ούτε από μια φωτογραφική πλάκα. τότε η εικόνα θα παραμείνει αόρατη, ακόμα κι αν το μικροσκόπιο επιλύσει τις λεπτομέρειες. Η αντίθεση επηρεάζεται τόσο από τις ιδιότητες του αντικειμένου, οι οποίες αλλάζουν τη φωτεινή ροή σε σύγκριση με το φόντο, όσο και από την ικανότητα των οπτικών να καταγράφουν τις προκύπτουσες διαφορές στις ιδιότητες της δέσμης. Οι δυνατότητες ενός μικροσκοπίου φωτός περιορίζονται από την κυματική φύση του φωτός. Οι φυσικές ιδιότητες του φωτός - χρώμα (μήκος κύματος), φωτεινότητα (πλάτος κύματος), φάση, πυκνότητα και κατεύθυνση διάδοσης του κύματος αλλάζουν ανάλογα με τις ιδιότητες του αντικειμένου. Αυτές οι διαφορές χρησιμοποιούνται στα σύγχρονα μικροσκόπια για τη δημιουργία αντίθεσης.

Μεγέθυνση μικροσκοπίουορίζεται ως το γινόμενο της αντικειμενικής μεγέθυνσης και της μεγέθυνσης του προσοφθάλμιου φακού. Τα τυπικά μικροσκόπια έρευνας έχουν μεγέθυνση προσοφθάλμιου φακού 10, και αντικειμενική μεγέθυνση 10, 40 και 100. Συνεπώς, η μεγέθυνση ενός τέτοιου μικροσκοπίου κυμαίνεται από 100 έως 1.000 έχει νόημα, αφού όμως η ανάλυση δεν βελτιώνεται. Αντίθετα, η ποιότητα της εικόνας υποβαθμίζεται.

Αριθμητικό διάφραγμαχρησιμοποιείται για να εκφράσει την ανάλυση ενός οπτικού συστήματος. Το αριθμητικό διάφραγμα είναι η οπτική «εμβέλεια» ενός φακού και είναι ένα μέτρο της ποσότητας φωτός που εισέρχεται στο φακό. Το αριθμητικό διάφραγμα του φακού υποδεικνύεται στην κάννη του φακού. Το άνοιγμα του συμπυκνωτή πρέπει να ταιριάζει με το αριθμητικό άνοιγμα του αντικειμενικού φακού. Το αριθμητικό άνοιγμα οποιουδήποτε φακού που συνορεύει με τον αέρα (δηλαδή ενός "ξηρού συστήματος") δεν μπορεί να υπερβαίνει το 1, καθώς ο δείκτης διάθλασης του αέρα είναι 1. Το αριθμητικό άνοιγμα μπορεί να αυξηθεί αυξάνοντας τον δείκτη διάθλασης του μέσου μεταξύ του μπροστινού αντικειμενικού φακού και του φακού. τη διαφάνεια, φέρνοντάς την πιο κοντά στον δείκτη διάθλασης του γυαλιού (1,5). Για να γίνει αυτό, μια σταγόνα υγρού με δείκτη διάθλασης μεγαλύτερο από τον δείκτη διάθλασης του αέρα τοποθετείται μεταξύ του μπροστινού φακού του αντικειμενικού φακού και του υπό μελέτη αντικειμένου, για παράδειγμα, μια σταγόνα νερού (n = 1,3), γλυκερίνη ( n = 1,4) ή λάδι κέδρου (βύθισης) (n = 1,5). Για καθένα από τα παραπάνω υγρά παράγονται ειδικοί φακοί, οι οποίοι ονομάζονται φακοί εμβάπτισης.

Μικροσκόπιο φωτόςπεριλαμβάνει τακτικά μικροσκοπία μετάδοσης (φωτεινό πεδίο, σκοτεινό πεδίο), αντίθεση φάσης, φωταύγεια. Πρόσφατα, έχουν αναπτυχθεί άλλες μέθοδοι μικροσκοπίας και μικροσκοπίων - αντιστροφή Και ομοεστιακή μικροσκοπία σάρωσης λέιζερ.

Μικροσκόπιο φωτεινού πεδίου σας επιτρέπει να εξετάζετε αντικείμενα σε εκπεμπόμενο φως σε φωτεινό πεδίο. Αυτός ο τύπος μικροσκοπίας προορίζεται να μελετήσει τη μορφολογία, το μέγεθος των κυττάρων, τη σχετική θέση τους, τη δομική οργάνωση των κυττάρων και άλλα χαρακτηριστικά. Το μικροσκόπιο φωτός έχει μέγιστη ανάλυση 0,2 microns, η οποία παρέχει μεγέθυνση υψηλής ακρίβειας του μικροσκοπίου έως και 1500x.

Μικροσκοπία αντίθεσης φάσης σας επιτρέπει να παρατηρήσετε πιο καθαρά ζωντανά διαφανή αντικείμενα που έχουν δείκτες διάθλασης κοντά σε αυτούς του μέσου. Η λειτουργία ενός μικροσκοπίου αντίθεσης φάσης βασίζεται στην παρεμβολή φωτός στο επίπεδο εικόνας, που προκαλείται από μια μετατόπιση φάσης (χρησιμοποιώντας έναν δακτύλιο φάσης στο διάφραγμα του ανοίγματος). Στη μικροσκοπία αντίθεσης φάσης, χρησιμοποιούνται συχνά βιολογικά μικροσκόπια με αντίστροφη οπτική - ανεστραμμένα μικροσκόπια. Σε τέτοια μικροσκόπια, οι στόχοι βρίσκονται στο κάτω μέρος και ο συμπυκνωτής βρίσκεται στην κορυφή.

Με τη χρήση μικροσκοπίας αντίθεσης φάσης, μελετώνται το σχήμα, το μέγεθος, η σχετική θέση των κυττάρων, η κινητικότητά τους, η αναπαραγωγή, η βλάστηση των σπορίων μικροοργανισμών κ.λπ. Χάρη στη χρήση αυτής της μεθόδου μικροσκοπίας, η αντίθεση των ζωντανών μη χρωματισμένων μικροοργανισμών αυξάνεται απότομα. φαίνονται σκούρα σε ανοιχτόχρωμο φόντο (αντίθεση θετικής φάσης ) ή ανοιχτόχρωμα σε σκούρο φόντο (αντίθεση αρνητικής φάσης).

Μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου βασίζεται στο φωτισμό ενός αντικειμένου με λοξές ακτίνες φωτός. Με τέτοιο φωτισμό, οι ακτίνες δεν εισέρχονται στον φακό, επομένως το οπτικό πεδίο φαίνεται σκοτεινό. Αυτός ο φωτισμός του παρασκευάσματος επιτυγχάνεται χρησιμοποιώντας έναν ειδικό συμπυκνωτή σκοτεινού πεδίου. Η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου είναι μια πολύ απλή αλλά αποτελεσματική τεχνική και είναι κατάλληλη για την απεικόνιση ζωντανών και μη χρωματισμένων βιολογικών δειγμάτων. Λαμβάνοντας υπόψη την ευκολία εγκατάστασης, η ποιότητα των εικόνων που προκύπτουν είναι πολύ καλή.

Κατά τη μικροσκοπία σε σκοτεινό πεδίομπορείτε να δείτε αντικείμενα των οποίων το μέγεθος μετριέται σε εκατοστά του μικρομέτρου, που είναι πέρα ​​από την ανάλυση ενός συμβατικού μικροσκοπίου φωτεινού πεδίου. Ωστόσο, η παρατήρηση αντικειμένων σε ένα σκοτεινό πεδίο επιτρέπει σε κάποιον να εξετάσει μόνο τα περιγράμματα των κυττάρων και δεν καθιστά δυνατή την εξέταση της εσωτερικής τους δομής.

Μικροσκοπία φωταύγειας (φθορισμού). με βάση την ικανότητα μιας σειράς ουσιών βιολογικής προέλευσης ή ορισμένων βαφών να λάμπουν όταν φωτίζονται με αόρατο υπεριώδες ή μπλε φως. Όταν χρησιμοποιείτε υπεριώδες φως, η ανάλυση του μικροσκοπίου μπορεί να φτάσει τα 0,1 μικρά.

Τα μικροβιακά κύτταρα υποβάλλονται σε επεξεργασία με ειδικές βαφές - φθοριόχρωμα (πορτοκαλί ακριδίνης, πριμουλίνη, ροδαμίνη κ.λπ.) με τη μορφή πολύ αραιωμένων υδατικών διαλυμάτων: 1:500–1:100.000 Τέτοια διαλύματα είναι ελαφρώς τοξικά, γεγονός που καθιστά δυνατή τη μελέτη ενός άθικτο κελί. Ανάλογα με τη χημική σύνθεση, οι κυτταρικές δομές προσροφούν τις βαφές σε διάφορους βαθμούς και φωτίζουν με διαφορετικούς τρόπους. Επιπλέον, τα φθοριόχρωμα απορροφώνται διαφορετικά από ζωντανά και νεκρά κύτταρα. Αυτό σας επιτρέπει να χρησιμοποιήσετε αυτός ο τύποςμικροσκοπία για κυτταρολογικές και ανοσολογικές μελέτες, προσδιορισμός βιωσιμότητας κυττάρων κ.λπ.

Ηλεκτρονική μικροσκοπία σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε αντικείμενα που δεν επιλύονται όταν χρησιμοποιείτε φως ή υπεριώδεις ακτίνες. Θεωρητικά άδεια ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μετάδοσηςείναι 0,002 nm. πραγματική ανάλυση του σύγχρονου ηλεκτρονικά μικροσκόπιαπλησιάζει τα 0,1 nm. Στην πράξη, η ανάλυση για βιολογικά αντικείμενα φτάνει τα 2 nm.

Το μικρό μήκος κύματος των ηλεκτρονίων καθιστά δυνατή τη διάκριση αντικειμένων με μέγεθος 0,5–1,0 nm. Στα σύγχρονα ηλεκτρονικά μικροσκόπια, επιτυγχάνεται μεγέθυνση 5000–200.000 στην οθόνη Χάρη σε μια τόσο υψηλή ανάλυση, καθίσταται δυνατός ο εντοπισμός λεπτομερειών των βακτηριακών δομών. Για παράδειγμα, με τον ψεκασμό αλάτων βαρέων μετάλλων που περιβάλλουν το βακτήριο και διεισδύουν στις επιφανειακές ανωμαλίες, προκύπτει αντίθεση λόγω διαφορικής κατακράτησης ηλεκτρονίων. Αυτό το αποτέλεσμα ονομάζεται αρνητική αντίθεση .

Ένα ηλεκτρονικό μικροσκόπιο στο οποίο μια εικόνα σχηματίζεται περνώντας (μεταδίδοντας) ηλεκτρόνια μέσα από ένα δείγμα ονομάζεται ημιδιαφανές (ή μετάδοση ).

ΣΕ ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης (Ηλεκτρονικό μικροσκόπιο σάρωσης (SEM)μια δέσμη ηλεκτρονίων σαρώνει γρήγορα την επιφάνεια του δείγματος, παράγοντας ακτινοβολία που σχηματίζει μια εικόνα σε μια φωτεινή οθόνη. Τα SEM χαρακτηρίζονται από υψηλή ανάλυση, μεγάλο εύρος μεγέθυνσης (έως 100.000 και υψηλότερο), μεγάλο βάθος εστίασης (~100 μm) και ποικιλία τρόπων λειτουργίας. Ένα μικροσκόπιο σάρωσης δίνει μια εικόνα των επιφανειών και σας επιτρέπει να αποκτήσετε μια τρισδιάστατη εικόνα.

Συνεστιακή μικροσκοπία λέιζερ καθιστά δυνατή τη λήψη καθαρής εικόνας και την παρατήρηση αντικειμένων σε εστίαση σε ολόκληρο το πεδίο. Αυτή η μέθοδος είναι κατάλληλη μόνο για τη μελέτη αυτόφωτων (φθορισμού) αντικειμένων. Όταν συνδυάζεται με την τεχνολογία υπολογιστών, είναι δυνατή η χωρική ανακατασκευή του υπό μελέτη αντικειμένου. Σε ένα ομοεστιακό μικροσκόπιο σάρωσης λέιζερ, οι εικόνες των εσωτερικών τομών σχηματίζονται με σάρωση με εστιασμένη δέσμη λέιζερ από διαφορετικά (405, 488, 532, 635 nm) λέιζερ και χωρικό φιλτράρισμα της ακτινοβολίας. Όταν χρησιμοποιείται μικροσκοπία σάρωσης κοντινού πεδίου (NFSM), επιτυγχάνεται υψηλή ανάλυση. Το μικρότερο μέγεθος στοιχείου που λαμβάνεται με χρήση SMBP είναι 20 nm σε μήκος κύματος φωτός 0,486 nm. Η εικόνα του ελεγχόμενου στοιχείου δεν περιέχει φαινόμενα περίθλασης ή παρεμβολής που καθιστούν δύσκολο τον προσδιορισμό των ορίων του. Ένα ιδιαίτερο χαρακτηριστικό του SMBM σε σύγκριση με ένα μικροσκόπιο ατομικής δύναμης είναι η ευαισθησία του στα οπτικά χαρακτηριστικά της επιφάνειας του δείγματος που ελέγχεται, το μήκος κύματος του φωτός, τη φωταύγεια κ.λπ.

Μικροσκόπιο παρεμβολής υπολογιστή σας επιτρέπει να αποκτήσετε μια εικόνα υψηλής αντίθεσης όταν παρατηρείτε υποκυτταρικές δομές. σε πολλές περιπτώσεις χρησιμοποιείται για τη μελέτη ζωντανών κυττάρων. Η αρχή λειτουργίας ενός αυτοματοποιημένου μικροσκοπίου παρεμβολής βασίζεται στην παρεμβολή των ακτίνων φωτός της ακτινοβολίας λέιζερ που ανακλάται από έναν καθρέφτη αναφοράς και έναν καθρέφτη στον οποίο τοποθετείται το αντικείμενο φάσης που μετράται. Θεωρητικά, η μέγιστη δυνατή ανάλυση μπορεί να είναι κατά μέσο όρο 0,2 nm, αλλά στην πράξη είναι 0,4 μικρά.

Υπολογιστική τομογραφία ακτίνων Χ (XCT), τομογραφία εκπομπής ποζιτρονίων (ΕΛΑΦΡΟ ΚΤΥΠΗΜΑ) σας επιτρέπει να παρατηρείτε αντικείμενα υπό κανονικές συνθήκες.

Μικροσκοπία(λατ. μΙκροσ - μικρό, μικρό και σκοποσ - βλέπω) - η μελέτη αντικειμένων με τη χρήση μικροσκοπίου. Χωρίζεται σε διάφορους τύπους: οπτική μικροσκοπία, ηλεκτρονική μικροσκοπία, μικροσκοπία λέιζερ ακτίνων Χ ή ακτίνων Χ, που χαρακτηρίζεται από τη χρήση ηλεκτρομαγνητικών ακτίνων με δυνατότητα εξέτασης και λήψης εικόνων ιχνοστοιχείων μιας ουσίας, ανάλογα με την ανάλυση οι συσκευές ().

Οπτικό μικροσκόπιο.Το ανθρώπινο μάτι είναι ένα φυσικό οπτικό σύστημα που χαρακτηρίζεται από μια ορισμένη ανάλυση, δηλαδή τη μικρότερη απόσταση μεταξύ των στοιχείων του παρατηρούμενου αντικειμένου (που γίνονται αντιληπτά ως σημεία ή γραμμές), στην οποία μπορούν ακόμα να διακριθούν μεταξύ τους. Για ένα κανονικό μάτι, όταν απομακρύνεται από το αντικείμενο με το λεγόμενο. καλύτερη απόσταση όρασης (D = 250 mm), η μέση κανονική ανάλυση είναι 0,176 mm. Τα μεγέθη των μικροοργανισμών, των περισσότερων φυτικών και ζωικών κυττάρων, των μικρών κρυστάλλων, των λεπτομερειών της μικροδομής των μετάλλων και των κραμάτων κ.λπ. είναι σημαντικά μικρότερα από αυτήν την τιμή. Τα μικροσκόπια έχουν σχεδιαστεί για να παρατηρούν και να μελετούν τέτοια αντικείμενα. διάφοροι τύποι. Τα μικροσκόπια χρησιμοποιούνται για τον προσδιορισμό του σχήματος, του μεγέθους, της δομής και πολλών άλλων χαρακτηριστικών των μικροαντικειμένων.

Ένα οπτικό ή ελαφρύ μικροσκόπιο χρησιμοποιεί ορατό φως που περνά μέσα από διαφανή αντικείμενα ή ανακλάται από αδιαφανή. Ένα οπτικό σύστημα πολλών φακών επιτρέπει σε κάποιον να αποκτήσει μια φαινομενικά μεγεθυμένη εικόνα του δείγματος. Η εικόνα που προκύπτει μπορεί να παρατηρηθεί με το μάτι (ή και τα δύο μάτια, με κιάλια), ή να φωτογραφηθεί και να μεταφερθεί σε βιντεοκάμερα για ψηφιοποίηση. Ένα σύγχρονο μικροσκόπιο περιλαμβάνει συνήθως ένα σύστημα φωτισμού, ένα τραπέζι για τη μετακίνηση ενός αντικειμένου (δείγμα) και σετ ειδικών φακών και προσοφθάλμιων φακών.

Έχουν αναπτυχθεί τύποι μικροσκοπίων που μπορούν να επεκτείνουν σημαντικά τις δυνατότητες του συμβατικού οπτικού μικροσκοπίου:

Μέχρι τη δεκαετία του 1950, εργάζονταν κυρίως στο φάσμα του ορατού φωτός. Το μάτι λειτουργεί στο οπτικό εύρος μήκους κύματος. Τα οπτικά μικροσκόπια δεν μπορούσαν να παρέχουν ανάλυση μικρότερη από το μισό κύκλο του κύματος ακτινοβολίας αναφοράς (για το ορατό εύρος, τα μήκη κύματος είναι 0,2–0,7 μm ή 200–700 nm). Η μέγιστη μεγέθυνση του οπτικού μικροσκοπίου είναι έως και 2000 φορές. Η περαιτέρω μεγέθυνση της εικόνας δεν είναι πρακτική, καθώς δεν μας επέτρεψε να εντοπίσουμε πρόσθετες λεπτομέρειες της δομής της ουσίας. Μεμονωμένα σωματίδια μεγέθους περίπου 0,15 μικρομέτρων είναι καθαρά ορατά σε μεγέθυνση 2000 φορές. Τα μικρότερα σωματίδια δεν αντανακλούν τις ακτίνες φωτός και δεν είναι ορατά στο μικροσκόπιο.

Ένα σύνολο μεθόδων ανιχνευτών ηλεκτρονίων για τη μελέτη της μικροδομής των στερεών, της τοπικής σύστασής τους και των μικροπεδίων τους (ηλεκτρικά, μαγνητικά κ.λπ.) χρησιμοποιώντας ηλεκτρονικά μικροσκόπια - όργανα στα οποία χρησιμοποιείται δέσμη ηλεκτρονίων για τη λήψη μεγεθυμένων εικόνων. Η ηλεκτρονική μικροσκοπία περιλαμβάνει επίσης τεχνικές για την προετοιμασία αντικειμένων υπό μελέτη, την επεξεργασία και την ανάλυση των πληροφοριών που προκύπτουν. Υπάρχουν δύο κύριες κατευθύνσεις της ηλεκτρονικής μικροσκοπίας: μετάδοση (μετάδοση) και ράστερ (σάρωση), με βάση τη χρήση κατάλληλων τύπων. Παρέχουν ποιοτικά διαφορετικές πληροφορίες για το αντικείμενο μελέτης και συχνά χρησιμοποιούνται μαζί. Η ανάκλαση, η εκπομπή, το ηλεκτρόνιο Auger, το Lorentz και άλλοι τύποι ηλεκτρονικής μικροσκοπίας είναι επίσης γνωστές, που συνήθως υλοποιούνται χρησιμοποιώντας προσαρτήματα σε ηλεκτρονικά μικροσκόπια μετάδοσης και σάρωσης.

Μικροσκόπιο ακτίνων Χ — ένα σύνολο μεθόδων για τη μελέτη της μικροσκοπικής δομής της ύλης χρησιμοποιώντας ακτίνες Χ. Το μικροσκόπιο ακτίνων Χ χρησιμοποιεί ειδικά όργανα που ονομάζονται μικροσκόπια ακτίνων Χ. Η ανάλυση φτάνει τα 100 nm, δηλαδή 2 φορές μεγαλύτερη από αυτή των οπτικών μικροσκοπίων (200 nm). Θεωρητικά, το μικροσκόπιο ακτίνων Χ μπορεί να επιτύχει 2 τάξεις μεγέθους καλύτερη ανάλυση από το οπτικό μικροσκόπιο (καθώς το μήκος κύματος της ακτινοβολίας ακτίνων Χ είναι 2 τάξεις μεγέθους μικρότερο). Ωστόσο, ένα σύγχρονο οπτικό μικροσκόπιο - νανοσκόπιο έχει ανάλυση έως και 3-10 nm.

Η μικροσκοπία ακτίνων Χ χωρίζεται σε:

• Μικροσκόπιο ανάκλασης
• Μικροσκόπιο προβολής
• Ηλεκτρονική μικροσκοπία
• Μικροσκόπιο λέιζερ ακτίνων Χ

Τα μικρότερα μεγέθη μικροοργανισμών καθορίζουν τη χρήση ακριβών οπτικών οργάνων - μικροσκοπίων - για τη μελέτη της μορφολογίας των βακτηρίων. Τα πιο συχνά χρησιμοποιούμενα μικροσκόπια είναι η μικροσκοπία φωτεινού πεδίου, η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου, η μικροσκοπία αντίθεσης φάσης και η μικροσκοπία φθορισμού. Για ειδικές μικροβιολογικές μελέτες χρησιμοποιείται ηλεκτρονική μικροσκοπία.

Μικροσκόπιο φωτεινού πεδίου

Η μικροσκοπία φωτεινού πεδίου πραγματοποιείται χρησιμοποιώντας ένα συμβατικό μικροσκόπιο φωτός, το κύριο μέρος του οποίου είναι ο φακός. Η μεγέθυνση υποδεικνύεται στο πλαίσιο του φακού: 8, 10, 20, 40, 90.

Κατά τη μελέτη μικροβίων, χρησιμοποιείται ένα σύστημα εμβάπτισης (φακός). Ο φακός εμβάπτισης βυθίζεται σε μια σταγόνα ελαίου κέδρου που εφαρμόζεται στο παρασκεύασμα. Το λάδι κέδρου έχει τον ίδιο δείκτη διάθλασης με το γυαλί και αυτό επιτυγχάνει τη μικρότερη διασπορά των ακτίνων φωτός (Εικ. 1.12).

Ρύζι. 1.12. Διαδρομή ακτίνων σε φακό εμβάπτισης

Η εικόνα που λαμβάνεται στο φακό μεγεθύνεται από ένα προσοφθάλμιο που αποτελείται από δύο φακούς. Τα οικιακά μικροσκόπια χρησιμοποιούν προσοφθάλμιους φακούς με μεγεθύνσεις 7, 10, 15 (Εικ. 1.13). Η συνολική μεγέθυνση ενός μικροσκοπίου καθορίζεται από το γινόμενο της αντικειμενικής μεγέθυνσης και της μεγέθυνσης του προσοφθάλμιου φακού. Στη μικροβιολογία, χρησιμοποιούνται συνήθως μεγεθύνσεις 900-1000 φορές. Η ποιότητα ενός μικροσκοπίου δεν εξαρτάται από το βαθμό μεγέθυνσης, αλλά από την ανάλυσή του.

Ρύζι. 1.13. Σχηματικό μικροσκόπιο σύνθετου φωτός για παρατήρηση φωτεινού πεδίου, προσαρμοσμένο για φωτισμό Köhler

Με αυτό πρέπει να κατανοήσουμε τη μικρότερη απόσταση μεταξύ δύο σημείων του παρασκευάσματος, στα οποία εξακολουθούν να διακρίνονται καθαρά στο μικροσκόπιο. Η ανάλυση των συμβατικών μικροσκοπίων φωτός με σύστημα εμβάπτισης είναι 0,2 μικρά.

Μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου

Η μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου βασίζεται σε ακολουθώντας την αρχή(Εικ. 1.14). Οι ακτίνες φωτίζουν το αντικείμενο όχι από κάτω, αλλά από το πλάι και δεν εισχωρούν στα μάτια του παρατηρητή: το οπτικό πεδίο παραμένει σκοτεινό και το αντικείμενο στο φόντο του φαίνεται φωτεινό. Αυτό επιτυγχάνεται χρησιμοποιώντας έναν ειδικό συμπυκνωτή (παραβολοειδές) ή έναν κανονικό συμπυκνωτή, καλυμμένο στο κέντρο με έναν κύκλο μαύρου χαρτιού.

Ρύζι. 1.14. Διάγραμμα μικροσκοπίου για παρατήρηση σε σκοτεινό πεδίο.

Οι προετοιμασίες για μικροσκοπία σκοτεινού πεδίου παρασκευάζονται χρησιμοποιώντας τον τύπο σταγόνας "κρεμαστή" και "θρυμματισμένη". Κατά την προετοιμασία του παρασκευάσματος, μια «θρυμματισμένη» σταγόνα του υλικού δοκιμής (βακτηριακή καλλιέργεια σε φυσιολογικό διάλυμα) εφαρμόζεται σε μια γυάλινη πλάκα, η οποία καλύπτεται με καλυπτρίδα. Μια σταγόνα υλικού γεμίζει ολόκληρο το διάστημα μεταξύ του γυαλιού του καλύμματος και της διαφάνειας, σχηματίζοντας ένα ομοιόμορφο στρώμα. Για να προετοιμάσετε μια κρεμαστή σταγόνα, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιήσετε ειδικές γυάλινες τσουλήθρες με κοιλότητα στο κέντρο και ολισθητήρες καλύμματος.

Το προς δοκιμή υλικό εφαρμόζεται στη μέση του γυαλιού καλύμματος. Οι άκρες της εσοχής στη διαφάνεια αλείφονται με βαζελίνη και με αυτό καλύπτεται ένα γυαλί κάλυψης έτσι ώστε η σταγόνα να βρίσκεται στο κέντρο της εσοχής. Στη συνέχεια, αναποδογυρίστε το παρασκεύασμα με το γυαλί κάλυψης προς τα επάνω. Το μικροσκόπιο σκοτεινού πεδίου χρησιμοποιείται για τη μελέτη ζωντανών, μη χρωματισμένων μικροοργανισμών.

Μικροσκοπία αντίθεσης φάσης

Όταν μια δέσμη φωτός διέρχεται από ένα άβαφο αντικείμενο, αλλάζει μόνο η φάση ταλάντωσης του φωτεινού κύματος, η οποία δεν γίνεται αντιληπτή από το ανθρώπινο μάτι. Για να γίνει η εικόνα αντίθετη, είναι απαραίτητο να μετατραπούν οι αλλαγές φάσης του κύματος φωτός σε ορατό πλάτος. Αυτό επιτυγχάνεται χρησιμοποιώντας έναν συμπυκνωτή αντίθεσης φάσης και έναν αντικειμενικό φακό (Εικ. 1.15).

Ρύζι. 1.15. Διάγραμμα μικροσκοπίου αντίθεσης φάσης.

Ένας συμπυκνωτής αντίθεσης φάσης είναι ένας κανονικός φακός με ένα περίστροφο και ένα σύνολο δακτυλιοειδών διαφραγμάτων για κάθε φακό. Ο φακός φάσης είναι εξοπλισμένος με μια πλάκα φάσης, η οποία λαμβάνεται με την εφαρμογή αλάτων στοιχείων σπάνιων γαιών στον φακό. Η εικόνα του δακτυλιοειδούς διαφράγματος συμπίπτει με τον δακτύλιο της πλάκας φάσης του αντίστοιχου φακού.

Το μικροσκόπιο αντίθεσης φάσης αυξάνει σημαντικά την αντίθεση ενός αντικειμένου και χρησιμοποιείται για τη μελέτη φυσικών παρασκευασμάτων.

Μικροσκόπιο φθορισμού

Το μικροσκόπιο φωταύγειας βασίζεται στην ικανότητα ορισμένων ουσιών, υπό την επίδραση του φωτός που προσπίπτει σε αυτές, να εκπέμπουν ακτίνες με διαφορετικό (συνήθως μεγαλύτερο) μήκος κύματος (φθορισμό). Τέτοιες ουσίες ονομάζονται φθορόχρωμα (κίτρινο ακριδίνης, ροδαμίνη κ.λπ.). Ένα αντικείμενο που έχει υποστεί επεξεργασία με φθορόχρωμο, όταν φωτίζεται με υπεριώδεις ακτίνες, αποκτά λαμπερό χρώμασε ένα σκοτεινό οπτικό πεδίο.

Το κύριο μέρος ενός μικροσκοπίου φθορισμού είναι ένας φωτιστής που διαθέτει μια λάμπα υπεριώδους και ένα σύστημα φίλτρου για αυτό (Εικ. 1.16). Είναι πολύ σημαντικό να χρησιμοποιείτε ένα μη φθορίζον λάδι εμβάπτισης.
Το μικροσκόπιο φωταύγειας στην πρακτική μικροβιολογία χρησιμοποιείται για την ένδειξη και τον εντοπισμό παθογόνων μολυσματικών ασθενειών.

Ρύζι. 1.16. Σχηματική αναπαράσταση μικροσκοπίου φθορισμού: 1 - λαμπτήρας τόξου. 2 - συλλέκτης χαλαζία. 3 - κυβέτα γεμάτη με διάλυμα θειικού χαλκού. 4 - μπροστινό μέρος του συλλέκτη. 5 - φίλτρο υπεριώδους ακτινοβολίας. 6 - πρίσμα? 7 - γυάλινη πλάκα ουρανίου. 8 - φίλτρο προσοφθάλμιου φακού, απορροφητικό
υπεριώδεις ακτίνες.

Ηλεκτρονική μικροσκοπία

Οι δυνατότητες των οπτικών μικροσκοπίων περιορίζονται από το υπερβολικά μεγάλο μήκος κύματος του ορατού φωτός (6000 A). Τα αντικείμενα μικρότερα από αυτήν την τιμή είναι πέρα ​​από την ανάλυση ενός μικροσκοπίου φωτός. Σε ηλεκτρονικό μικροσκόπιο, αντί για κύματα φωτός, χρησιμοποιούνται δέσμες ηλεκτρονίων, οι οποίες έχουν εξαιρετικά μικρό μήκος κύματος και υψηλή ανάλυση (Εικ. 1.17).

Ρύζι. 1.17. Σχέδιο ηλεκτρονικού μικροσκοπίου μετάδοσης.

Ένα όπλο ηλεκτρονίων χρησιμοποιείται ως πηγή δέσμης ηλεκτρονίων, η βάση του οποίου είναι ένα θερμαινόμενο νήμα βολφραμίου ηλεκτροπληξία. Μεταξύ του νήματος βολφραμίου και της ανόδου στη διαδρομή των ηλεκτρονίων βρίσκεται ηλεκτρικό πεδίουψηλής τάσης. Η ροή ηλεκτρονίων αναγκάζει τη φωσφορίζουσα οθόνη να λάμπει. Όταν διέρχονται από ένα αντικείμενο του οποίου τα μέρη έχουν διαφορετικό πάχος, τα ηλεκτρόνια θα καθυστερήσουν ανάλογα, τα οποία θα εμφανίζονται στην οθόνη ως σκοτεινές περιοχές. Το αντικείμενο αποκτά αντίθεση.

Τα παρασκευάσματα για ηλεκτρονική μικροσκοπία παρασκευάζονται στα λεπτότερα κολλοειδή αντικείμενα που εξετάζονται μετά την ξήρανση ("φυσικά παρασκευάσματα"), διασκορπισμός με βαρέα μέταλλα, εξαιρετικά λεπτές τομές με τη μέθοδο του αντιγράφου κ.λπ.

Το ηλεκτρονικό μικροσκόπιο μπορεί να ανιχνεύσει τις μικρότερες δομές, να επιτύχει μεγεθύνσεις έως και 200.000 και να δει αντικείμενα τόσο μικρά όσο 0,002 μικρά.

L.V. Timoschenko, M.V. Τσούμπικ