Τρόπος έκχυσης σε ζελατίνη.

Η μέθοδος είναι κατάλληλη για εμβρυολογική. μελέτες, γέμισμα χαλαρών ιστών και οργάνων (δεν προκαλεί ρυτίδες), για μελέτες αναγνώρισης λιπών και λιπιδίων. Το μπλοκ ζελατίνης κόβεται μόνο με ψυκτικό μικροτόμο.

Παρασκευάζονται δύο διαλύματα για πλήρωση:

α) Διάλυμα 25%.

β) Διάλυμα 12,5%: 1 μέρος παχύρρευστου διαλύματος αραιώνεται με 1 μέρος ζεστού καρβολικού νερού 1%. Για την παρασκευή του τελευταίου, 1 g καρβολικού οξέος διαλύεται σε 100 ml απεσταγμένου νερού με συνεχή ανακίνηση.

Τα παρασκευασμένα διαλύματα ζελατίνης χύνονται σε χωριστούς δοκιμαστικούς σωλήνες ή άλλα μικρά δοχεία σε δόσεις,

Για την παρασκευή του, 2,0 g αιματοξυλίνης διαλύονται σε 100 ml αλκοόλης 96% και στο προκύπτον διάλυμα προστίθενται 100 ml απεσταγμένου νερού, 100 ml γλυκερίνης, 3,0 g στυπτηρίας καλίου και 10 ml παγόμορφου οξικού οξέος. Όλα τα συστατικά πρέπει να προστεθούν με την καθορισμένη σειρά. Το προκύπτον διάλυμα πρέπει να τοποθετηθεί στο φως και με πρόσβαση στον αέρα για τουλάχιστον 15 ημέρες, έτσι ώστε η αιματοξυλίνη να έχει χρόνο να οξειδωθεί σε αιματίνη, που είναι η βαφή. Το βάζο με το διάλυμα καλύπτεται με χάρτινο καπάκι ή γάζα διπλωμένο πολλές φορές. Η αιματοξυλίνη του Ehrlich λερώνει τους πυρήνες Μπλε χρώμα. Για να χρωματίσετε το κυτταρόπλασμα, χρησιμοποιήστε ένα υδατικό διάλυμα ηωσίνης 1%.

Αυτή η τεχνική είναι η πιο συχνά χρησιμοποιούμενη και επομένως πρέπει να περιγραφεί με περισσότερες λεπτομέρειες. Αυτή η μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τη χρώση τμημάτων σελοϊδίνης, αποκηρωμένων τμημάτων, τμημάτων παραφίνης ή κατεψυγμένων τμημάτων. Πριν από τη χρώση, τα κατεψυγμένα τμήματα θα πρέπει να απολιπανθούν τοποθετώντας τα σε αλκοόλη 96% για 20-30 λεπτά ή όλη τη νύχτα. Στη συνέχεια, τα τμήματα μεταφέρονται σε απεσταγμένο νερό. Τα τμήματα κελλοϊδίνης μεταφέρονται από το ένα μπουκάλι στο άλλο χρησιμοποιώντας μια βελόνα ανατομής με καμπύλο άκρο. Τα αποπαραφινωμένα και κατεψυγμένα τμήματα μπορούν να χρωματιστούν σε γυάλινες πλάκες χύνοντας ή χύνοντας κατάλληλα διαλύματα. Τα διαλύματα βαφής μπορούν να χυθούν πίσω για επαναχρησιμοποίηση.

Η διαδικασία για τη χρώση τμημάτων με αιματοξυλίνη-ηωσίνη είναι η εξής::

1) τα τμήματα μεταφέρονται σε απεσταγμένο νερό.

2) χρώση με αιματοξυλίνη Ehrlich για 2-5 λεπτά.

3) πλύθηκε σε απεσταγμένο νερό.

4) στη συνέχεια πλύθηκε νερό βρύσης 3-5 λεπτά;

5) πραγματοποιήστε έλεγχο κάτω από μικροσκόπιο.

6) διαφοροποίηση με διάλυμα υδροχλωρικού οξέος 1% σε αλκοόλη 70° για 1-2 δευτερόλεπτα.

7) Μεταφέρετε γρήγορα τα τμήματα στο νερό της βρύσης για 30 λεπτά με συχνές αλλαγές. στο νερό της βρύσης, το κερασί χρώμα των πυρήνων αλλάζει σε μπλε.

8) πραγματοποιήστε έλεγχο κάτω από μικροσκόπιο. εάν η χρωματίνη και ο πυρήνας δεν είναι ευδιάκριτα, τότε η διαφοροποίηση θα πρέπει να επαναληφθεί (τα τμήματα μπορούν να προβληθούν με μεγάλη μεγέθυνση, καλύπτοντάς τα με καλυπτρίδα).

9) πλύθηκε σε απεσταγμένο νερό.

10) 1% υδατικό διάλυμα ηωσίνης 0,5-1 min;

11) πλύθηκε σε απεσταγμένο νερό (και διαφοροποιημένο, αφού το νερό ξεπλένει την ηωσίνη). Ο χρόνος πλύσης ελέγχεται από το χρώμα της κοπής.

12) η αφυδάτωση πραγματοποιείται, διαυγάζεται σε ξυλόλιο και τοποθετείται σε βάλσαμο. Η ηωσίνη ξεπλένεται επίσης σε αλκοόλες, επομένως οι τομές πρέπει να γίνονται γρήγορα χρησιμοποιώντας αλκοόλες. Ο χρόνος για τη χρώση σε αιματοξυλίνη θα πρέπει να ρυθμιστεί στις πρώτες 2-3 τομές και στη συνέχεια όλα τα τμήματα αυτού του μπλοκ θα πρέπει να χρωματιστούν με τον ίδιο τρόπο. Η διαφοροποίηση σε διάλυμα υδροχλωρικού οξέος σε αλκοόλη μπορεί να μην πραγματοποιηθεί, αλλά στην περίπτωση αυτή οι δομές του πυρήνα θα είναι λιγότερο διαυγείς και μπορεί να υπάρχει ένα γαλαζωπό φόντο στο κυτταρόπλασμα.

Αυτή η χρώση είναι διπλή: η αιματοξυλίνη, μια βασική χρωστική, χρωματίζει τους κυτταρικούς πυρήνες, η ηωσίνη, μια όξινη χρωστική, βάφει το πρωτόπλασμα των κυττάρων και, σε μικρότερο βαθμό, διάφορες μη κυτταρικές δομές.

Ο χρωματισμός περιλαμβάνει τη χρήση μιας βασικής βαφής αιματοξυλίνη, που χρωματίζει τις βασεόφιλες κυτταρικές δομές έντονο μπλε και μια βαφή αλκοολικού οξέος ηωσίνη Υ, χρωματίζοντας τις ηωσινόφιλες δομές του κυττάρου κόκκινο-ροζ. Οι βασεόφιλες δομές είναι γενικά αυτές που περιέχουν νουκλεϊκά οξέα(DNAΚαι RNA):πυρήνα του κυττάρου,ριβοσώματακαι περιοχές πλούσιες σε RNA κυτόπλασμα. Οι ηωσινόφιλες δομές περιέχουν ενδο- και εξωκυττάρια σκίουροι, Για παράδειγμα, Σώματα Lewy. Το κυτταρόπλασμα είναι ένα ηωσινοφιλικό περιβάλλον. ερυθρά αιμοσφαίριαπάντα βαμμένο έντονο κόκκινο.

2. Χρώση σιδήρου αιματοξυλίνης

Βαφή για μικροσκοπικά παρασκευάσματα. Παρέχει οπτικοποίηση κυτταρικών πυρήνων σε τομές (παραφίνη, κρυοστάτης, δονητή, κατασκευασμένος σε μικροτόμο κατάψυξης) και κυτταρολογικά παρασκευάσματα. Το αντιδραστήριο δεν περιέχει αιθανόλη και μεθανόλη. Προορίζεται για χρήση ως πυρηνική βαφή κατά τη χρώση συνδετικού ιστού σύμφωνα με τους Van Geson, Mallory, Masson και άλλες πολύχρωμες μεθόδους χρώσης ιστολογικά παρασκευάσματα. Τα πλεονεκτήματα της προτεινόμενης αιματοξυλίνης είναι η εξαιρετική και έντονη χρώση των κυτταρικών πυρήνων σε τομές, η σταθερότητα του χρώματος στο πικρικό οξύ και άλλα ασθενή οξέα, η έλλειψη τάσης για επαναχρωματισμό του φαρμάκου (υπόκειται σε συστάσεις) και η ανάγκη για διαφοροποίηση χρώματος.

3. Χρώση με μπλε του μεθυλενίου LeflerΤεχνική χρωματισμού. Αναμείξτε 30 ml κορεσμένου διαλύματος αλκοόλης κυανού του μεθυλενίου με 100 ml διαλύματος υδροξειδίου του καλίου 0,01%. Τα επιχρίσματα βάφονται για 3 - 5 λεπτά, ξεπλένονται με τρεχούμενο νερό, διαφοροποιούνται για 3 δευτερόλεπτα σε διάλυμα οξικού οξέος 0,5% και ξεπλένονται με τρεχούμενο νερό. Περάστε από αλκοόλες, διαυγάστε σε ξυλόλιο και κλείστε σε βάλσαμο. Τα παρασκευάσματα μπορούν να μελετηθούν με εμβάπτιση λαδιού χωρίς να περικλείονται σε βάλσαμο, αλλά σε αυτή την περίπτωση δεν αποθηκεύονται για πολύ. Αποτέλεσμα: Τα βακτήρια αποκτούν βαθύ μπλε χρώμα.

Οργανική Βασική Θειαζίνη βαφή, χρησιμοποιείται για χρωματισμό βαμβάκι,μαλλί,μεταξωτάσε έντονο μπλε χρώμα, αλλά το χρώμα είναι ασθενώς σταθερό στο φως. ΣΕ αναλυτική Χημείαχρησιμοποιείται για τον προσδιορισμό χλωρικά,υπερχλωρικά,κατιόνταΕρμής,κασσίτερος,μαγνήσιο,ασβέστιο,κοβάλτιο,κάδμιο.

ΣΕ φάρμακοπου χρησιμοποιείται ως αντισηπτικό,αντίδοτοσε περίπτωση δηλητηρίασης κυανιούχα,μονοξείδιο του άνθρακαΚαι υδρόθειο. Αυτή η ένωση έχει αναφερθεί ότι είναι εξαιρετικά αποτελεσματική στη θεραπεία Η ασθένεια Αλτσχάϊμερ.

4. Χρώση με πικροφουξίνη

Όταν χρωματίζονται με πικροφουξίνη, οι διογκωμένες δέσμες κολλαγόνου είναι έντονο κόκκινο, ομοιογενείς με μια κακώς διακριτή ινώδη δομή. Σε περιοχές με πιο σοβαρή βλάβη, οι δέσμες κολλαγόνου είναι ανομοιόμορφα χρωματισμένες, σε ορισμένα σημεία είναι έντονο κόκκινο, σε άλλα με κηλίδες κίτρινο χρώμα, κατά τόπους καφέ. 5. Χρώση Romanovsky-GiemsaΠροετοιμασία της βαφής Πριν από τη χρώση των επιχρισμάτων, η τελική υγρή βαφή αραιώνεται με ρυθμό 1-2 σταγόνες βαφής ανά 1 ml απεσταγμένου νερού. Τα επιχρίσματα βάφονται για 20 - 25 λεπτά στους 370 C σε υγρό θάλαμο (κλειστό τρυβλίο Petri με βρεγμένο φίλτρο στο κάτω μέρος). Μετά τη χρώση, τα επιχρίσματα πλένονται σε τρεχούμενο νερό, ξηραίνονται στον αέρα και εξετάζονται με εμβάπτιση σε λάδι. Το μείγμα βαφής Romanovsky-Giemsa σε μορφή σκόνης (βαφή του εμπορίου) διαλύεται σε ένα μείγμα ίσων όγκων μεθυλικής αλκοόλης και γλυκερίνης (800 mg βαφής ανά 100 ml διαλύτη). Η βαφή δεν διαλύεται καλά, επομένως είναι προτιμότερο να την αλέσετε με διαλύτη σε ποσότητα 300 mg ανά 100 ml και στη συνέχεια, ανακατεύοντας, προσθέστε τη βαφή μέχρι να επιτευχθεί η επιθυμητή συγκέντρωση. Η προετοιμασία της βαφής συχνά διαρκεί αρκετές ημέρες. Είναι σημαντικό να χρησιμοποιείτε χημικώς καθαρή μεθυλική αλκοόλη και γλυκερίνη ως διαλύτες, καθώς οι ακαθαρσίες βλάπτουν τις ιδιότητες της βαφής. Αντί για μεθυλική αλκοόλη, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε 100% αιθυλική αλκοόλη. Το παρασκευασμένο μείγμα χρωματισμού αποθηκεύεται σε δροσερό, ξηρό μέρος σε καλά κλεισμένο δοχείο. Τεχνική χρώσης 1. Τα επιχρίσματα στερεωμένα σε μεθυλική αλκοόλη χρωματίζονται με διάλυμα (1 ml έτοιμου υγρού χρώματος + 2 ml βασικού ρυθμιστικού διαλύματος + 47 ml απεσταγμένου νερού) για 40-120 λεπτά (η διάρκεια της χρώσης επιλέγεται εμπειρικά ). Χρησιμοποιούν ένα ρυθμιστικό διάλυμα φωσφορικών, αλλά το pH του ρυθμιστικού εξαρτάται από τον τύπο του επιχρίσματος: για επίχρισμα μυελού των οστών - 5,8 - 6,0, για επίχρισμα αίματος - 6,4 - 6,5, για αναγνώριση πρωτοζώων - 6,8, πλασμώδιο ελονοσίας - 7, 0 - 7.2. 2. Ξεπλύνετε σε απεσταγμένο νερό, στεγνώστε και εξετάστε το υπό βύθιση. Αποτέλεσμα: τα βακτήρια βάφονται ιώδες-κόκκινο, το κυτταρόπλασμα των κυττάρων είναι μπλε και οι πυρήνες κόκκινοι.

6. Βαφή με κόκκινο του Κονγκό

Εμφάνιση - κόκκινο-καφέ κρύσταλλα. ελάχιστα διαλυτό σε κρύο νερό. ΣΕ οργανικούς διαλύτεςΔεν διαλύεται Αυτή η βαφή χρησιμοποιείται σε μικροσκοπικές μελέτες και χρησιμοποιείται με τη μορφή αλκοόλης, υδατικού διαλύματος ή αμμωνίας για τη χρώση της κυτταρικής μεμβράνης. μανιτάρια(μόνο ή σε συνδυασμό με γεντιανή βιολέτα) . Το κόκκινο του Κονγκό χρησιμοποιείται ευρέως στην ιστολογία για την ανίχνευση αμυλοειδούς . Εκτός από αυτή την "κλασική" εφαρμογή, το κόκκινο του Κονγκό χρησιμοποιείται σε δεκάδες άλλες διαδικασίες χρώσης στη ζωολογία ασπόνδυλων, τη βοτανική έρευνα, την κυτταρολογία ανθρώπων και ζώων .

Η χρώση με αιματοξυλίνη-ηωσίνη είναι η πιο κοινή μέθοδος για τη χρώση τομών. Αυτή η μέθοδος καθιστά δυνατή τη δημιουργία σχέσεων μεταξύ τμημάτων ενός οργάνου, προσδιορίζοντας τέλεια όλα τα κυτταρικά στοιχεία και ορισμένες μη κυτταρικές δομές. Σχεδόν σε όλες τις περιπτώσεις, ανεξαρτήτως της εργασίας, χρησιμοποιείται χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης. Στις περισσότερες περιπτώσεις, για να μελετήσει κανείς τη δομή ενός φυσιολογικού ή αλλοιωμένου οργάνου ως αποτέλεσμα ασθένειας, περιορίζεται σε αυτή τη μέθοδο χρώσης. Σε άλλες περιπτώσεις, όταν ο ερευνητής βρίσκεται αντιμέτωπος με ένα ειδικό έργο, χρησιμοποιούνται ειδικές μέθοδοι, ενώ παράλληλα χρωματίζεται ένας αριθμός τομών παράλληλα με αιματοξυλίνη-ηωσίνη.

Αυτή η χρώση είναι διπλή: η αιματοξυλίνη, μια βασική χρωστική, χρωματίζει τους κυτταρικούς πυρήνες, η ηωσίνη, μια όξινη χρωστική, βάφει το πρωτόπλασμα των κυττάρων και, σε μικρότερο βαθμό, διάφορες μη κυτταρικές δομές.

7. Τι εννοείται με τον όρο βασεόφιλη χρώση ιστολογικών δομών;

Χρώση κυτταρικών και ιστικών δομών με βασικές βαφές.

8. Τι σημαίνει ο όρος οξυφιλική χρώση ιστολογικών δομών;

Χρώση κυτταρικών και ιστικών δομών με όξινες βαφές.

9. Ηλεκτρονικές μικροσκοπικές μέθοδοι μελέτης ιστολογικών σκευασμάτων.

Ηλεκτρονική μικροσκοπική κυτταροχημεία, Ηλεκτρονική μικροσκοπική ανοσοκυτταροχημεία και Ηλεκτρονική μικροσκοπική αυτοραδιογραφία

10. Ιστοχημικές μέθοδοι μελέτης ιστολογικών σκευασμάτων.

α) Βασίζονται ιστοχημικές μέθοδοισε μια συγκεκριμένη αντίδρασημεταξύ ενός χημικού αντιδραστηρίου και ενός συγκεκριμένου συστατικού του φαρμάκου. β) Το προϊόν της αντίδρασης που προκύπτει έχει χρώμα διαφορετικό από το χρώμα του αρχικού αντιδραστηρίου.

Κατά προσέγγιση σχήμα για τη χρώση παρασκευασμάτων αιματοξυλίνης-ηωσίνης

1. Παραφίνη ή κατεψυγμένα τμήματα μεταφέρονται στο νερό.

2. Χρώση με αιματοξυλίνη - μέσα σε 3-5 λεπτά.

3. Ξεπλύνετε με νερό - 2 λεπτά.

4. Διαφοροποίηση σε αλκοόλη οξινισμένη με υδροχλωρικό οξύ (διάλυμα 1% υδροχλωρικού οξέος σε 70% αλκοόλη), αρκετά δευτερόλεπτα, ακολουθούμενη από αποκατάσταση με αλκαλικό νερό (περίπου 1 λεπτό). Αυτό το στάδιο είναι επιθυμητό, ​​αλλά δεν απαιτείται.

5. Ξεπλύνετε με τρεχούμενο νερό.

6. Ξεπλύνετε με απεσταγμένο νερό.

7. Χρώση με ηωσίνη 1% - 1-2 λεπτά.

8. Ξεπλύνετε με απεσταγμένο νερό.

9. Αφυδάτωση σε αλκοόλ - 2 λεπτά.

10. Καθαρισμός σε ξυλόλιο - 2 min.

11. Συμπέρασμα της ενότητας - μια σταγόνα βάλσαμο, ένα γυαλί κάλυψης.

Μέθοδοι έρευνας στην ιστολογία και την κυτταρολογία

Οι μέθοδοι έρευνας στην ιστολογία περιλαμβάνουν την παρασκευή ιστολογικών σκευασμάτων και τη μελέτη τους με τη χρήση μικροσκοπίου.

Η κύρια μέθοδος ιστολογικής εξέτασης είναι η φωτομικροσκόπηση, οι ποικιλίες της οποίας είναι:

- μικροσκοπία αντίθεσης φάσης- βασίζεται στη μετατόπιση φάσης των κυμάτων φωτός όταν οι ακτίνες διέρχονται από δομές του υπό μελέτη αντικειμένου που έχουν διαφορετική πυκνότητα, γεγονός που οδηγεί σε αύξηση της αντίθεσης αυτών των δομών και καθιστά δυνατή την εξέταση μη χρωματισμένων και ζωντανών κυττάρων.

- μικροσκοπία παρεμβολής- με βάση τις διαφορετικές διαδρομές των ακτίνων φωτός, οι οποίες δίνουν μια εικόνα ενός αντικειμένου με την οποία μπορεί κανείς να κρίνει τη συγκέντρωση διαφόρων ουσιών στο κύτταρο.

- μικροσκοπία πόλωσης- με βάση τη διπλή διάθλαση των κυτταρικών δομών, η οποία καθιστά δυνατή τη μελέτη σπειροειδών δομών ή δομών που δεν είναι ορατές με άλλες ερευνητικές μεθόδους (για παράδειγμα, μυοϊνίδια).

- μικροσκοπία φωταύγειας (φθορισμού).- βασίζεται στο φαινόμενο της λάμψης ορισμένων ουσιών όταν εκτίθενται σε ακτίνες βραχέων κυμάτων, γεγονός που καθιστά δυνατή τη μελέτη της περιεκτικότητας σε νουκλεϊκά οξέα και ορισμένων πρωτεϊνών στα κύτταρα, ενώ τα παρασκευάσματα είναι προ-χρωματισμένα με ειδικές βαφές - φθοριόχρωμα.

- υπεριώδες μικροσκόπιο- βασίζεται στη χρήση του υπεριώδους τμήματος του φάσματος για να φωτίσει το αντικείμενο.

Να μελετήσει λεπτό εσωτερική δομήκύτταρα και μεσοκυτταρικές δομές (υπερδομές) χρησιμοποιούν ηλεκτρονική μικροσκοπία.

Να αναγνωρίσουν διάφορες χημικές ενώσεις στα κύτταρα (αμινοξέα, πρωτεΐνες, λίπη, υδατάνθρακες, μεταλλικά στοιχείακ.λπ.) χρησιμοποιούν μεθόδους ιστοχημικής έρευνας που βασίζονται στη χρήση χρωστικών που δεσμεύονται επιλεκτικά μόνο με εκείνες τις χημικές ενώσεις του κυττάρου που πρέπει να μελετηθούν και τις βάφουν, καθιστώντας τις ορατές.

Η μέθοδος αυτοραδιογραφίας, που βασίζεται στην εισαγωγή στο κύτταρο ισοτόπων που περιλαμβάνονται στις αντίστοιχες δομές (για παράδειγμα, η επισημασμένη θυμιδίνη ενσωματώνεται στους πυρήνες των κυττάρων που συνθέτουν DNA), χρησιμοποιείται για τη μελέτη της πορείας των συνθετικών διεργασιών στους ιστούς.

Για τη μελέτη των μηχανισμών πολλαπλασιασμού και διαφοροποίησης των κυττάρων, την απόκρισή τους σε διάφορες επιρροές, χρησιμοποιείται η μέθοδος της καλλιέργειας κυττάρων και ιστών, η οποία βασίζεται στην ανάπτυξη διαφόρων κυττάρων εκτός του σώματος σε τεχνητά θρεπτικά μέσα.

Ενας από σύγχρονες μεθόδουςπου χρησιμοποιείται στην ιστολογία είναι η ομοεστιακή μικροσκοπία, η οποία σας επιτρέπει να αποκτήσετε μια τρισδιάστατη εικόνα του υπό μελέτη αντικειμένου χρησιμοποιώντας ειδικά προγράμματα υπολογιστή.

Ιστολογικό δείγμα ανθρώπινου πνευμονικού ιστού χρωματισμένο με αιματοξυλίνη-ηωσίνη.

Χρώση με αιματοξυλίνη και ηωσίνη(χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης) είναι μια από τις πιο κοινές μεθόδους χρώσης στην ιστολογία. Χρησιμοποιείται ευρέως στην ιατρική διαγνωστική, ιδιαίτερα στην ογκολογία για τη χρώση ιστού που λαμβάνεται με βιοψία.

Η χρώση περιλαμβάνει τη χρήση της βασικής χρωστικής αιματοξυλίνης, η οποία χρωματίζει τις βασεόφιλες κυτταρικές δομές σε έντονο μπλε, και της χρωστικής αλκοολικού οξέος ηωσίνη Υ, η οποία χρωματίζει τις ηωσινόφιλες κυτταρικές δομές σε κόκκινο-ροζ. Οι βασεόφιλες δομές είναι γενικά αυτές που περιέχουν νουκλεϊκά οξέα (DNA και RNA): τον κυτταρικό πυρήνα, τα ριβοσώματα και τις πλούσιες σε RNA περιοχές του κυτταροπλάσματος. Οι ηωσινόφιλες δομές περιέχουν ενδο- και εξωκυτταρικές πρωτεΐνες, όπως τα σώματα Lewy. Το κυτταρόπλασμα είναι ένα ηωσινοφιλικό περιβάλλον. Τα ερυθρά αιμοσφαίρια είναι πάντα βαμμένα με έντονο κόκκινο.

Τεχνική χρώσης αιματοξυλίνης-ηωσίνης

1. Αφαιρέστε την παραφίνη από τα τμήματα σε ορθο-ξυλόλιο ή τολουόλιο, περάστε μέσα από αλκοόλες φθίνουσας συγκέντρωσης και βάλτε το σε νερό (δύο μερίδες ξυλολίου ή τολουολίου - 3-5 λεπτά, 96° αιθανόλη - 3 λεπτά, 80° αιθανόλη - 3 λεπτά, 70° αιθανόλη - 3 λεπτά, απεσταγμένο νερό - 5 λεπτά).
2. Χρωματίζουμε με αιματοξυλίνη για 7-10 λεπτά (ανάλογα με την ωριμότητα της βαφής).
3. Ξεπλύνετε σε απεσταγμένο νερό για 5 λεπτά.
4. Διαφοροποιήστε σε υδροχλωρικό οξύ 1% σε αιθανόλη 70° μέχρι να ροδίσουν οι τομές.
5. Πλένεται με απεσταγμένο νερό και στη συνέχεια με ασθενές (0,5%) διάλυμα αμμωνίας μέχρι τα τμήματα να γίνουν μπλε.
6. Χρώμα υδατικό διάλυμαηωσίνη 0,5-1 λεπτό (ανάλογα με το επιθυμητό χρώμα).
7. Πλύνετε σε τρεις δόσεις απεσταγμένου νερού για να αφαιρέσετε την περίσσεια ηωσίνης.
8. Αφαιρέστε το νερό από τα τμήματα σε μία δόση αιθανόλης 70°, δύο μερίδες αιθανόλης 96°. Η έκθεση σε κάθε μερίδα αλκοόλ είναι 2 λεπτά.
9. Οι τομές καθαρίζονται σε δύο δόσεις καρβολικού ξυλολίου (μίγμα τηγμένης φαινόλης και ξυλολίου ή τολουολίου σε αναλογία 1:4 ή 1:5) - 1 λεπτό.
10. Τα τμήματα τελικά αφυδατώνονται σε δύο μέρη ξυλολίου ή τολουολίου. Η άφιξη των φετών είναι 2 λεπτά.
11. Ενσωματώστε τμήματα σε βάλσαμο Καναδά ή συνθετικό μέσο για την τοποθέτηση ιστολογικών τομών.

Ορισμένες δομές χρωματίζονται ελάχιστα με αιματοξυλίνη και ηωσίνη (συνήθως υδρόφοβη) και απαιτούν άλλες μεθόδους χρώσης. Για παράδειγμα, περιοχές κυττάρων πλούσιες σε λιπίδια και μυελίνη παραμένουν άχρωμες: τα λιποκύτταρα, το περίβλημα μυελίνης των νευραξόνων, η μεμβράνη της συσκευής Golgi κ.λπ.

δείτε επίσης

Συνδέσεις

• Rosen Lab, Τμήμα Μοριακής και Κυτταρικής Βιολογίας, Baylor College of Medicine) Πρωτόκολλο βήμα προς βήμα

Ίδρυμα Wikimedia. 2010.

Δείτε τι είναι η «χρώση με αιματοξυλίνη και ηωσίνη» σε άλλα λεξικά:

Ιστολογικό δείγμα ανθρώπινου πνευμονικού ιστού, χρωματισμένο με αιματοξυλίνη και ηωσίνη. Η χρώση αιματοξυλίνης-ηωσίνης (χρώση αιματοξυλίνης και ηωσίνης) είναι μια από τις πιο κοινές τεχνικές ιστολογίας. Χρησιμοποιείται ευρέως στην ιατρική... ... Wikipedia

Φυματίωση του αναπνευστικού. Τα αναπνευστικά όργανα προσβάλλονται συχνότερα από τη φυματίωση (αναπνευστική φυματίωση). Σύμφωνα με την κλινική ταξινόμηση της φυματίωσης που είναι αποδεκτή στη χώρα μας, διακρίνονται οι ακόλουθες μορφές φυματίωσης. δ.: πρωτοβάθμια... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Heart Η καρδιά (λατινικά cor, ελληνικά cardia) είναι ένα κοίλο ινομυϊκό όργανο που, λειτουργώντας ως αντλία, εξασφαλίζει την κίνηση του αίματος στο κυκλοφορικό σύστημα. Ανατομία Η καρδιά βρίσκεται στο πρόσθιο μεσοθωράκιο (Mediastinum) στο Περικάρδιο μεταξύ... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

- (λευκόσκοι, ελλην. leukos white + ōsis, συνώνυμο λευχαιμία) ασθένειες όγκου που εμφανίζονται με τη μετατόπιση φυσιολογικών αιμοποιητικών μικροβίων: ο όγκος προκύπτει από αιμοποιητικά κύτταρα του μυελού των οστών. Η συχνότητα εμφάνισης του L. δεν είναι ίδια σε διαφορετικές... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Η πνευμονία (πνευμονία, ελληνικός πνευμονικός πνεύμονας) είναι μια μολυσματική φλεγμονή του πνευμονικού ιστού, που επηρεάζει όλες τις δομές των πνευμόνων με την υποχρεωτική προσβολή των κυψελίδων. Μη λοιμώδεις φλεγμονώδεις διεργασίες στον πνευμονικό ιστό που συμβαίνουν υπό την επίδραση επιβλαβών... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

Η εξωπνευμονική φυματίωση είναι μια υπό όρους έννοια που ενώνει μορφές φυματίωσης οποιουδήποτε εντοπισμού, εκτός από τους πνεύμονες και άλλα αναπνευστικά όργανα. Σύμφωνα με την κλινική ταξινόμηση της φυματίωσης (ΤΒ), που υιοθετήθηκε στη χώρα μας, σε T.v. περιλαμβάνω... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Placenta (λατ. κέικ πλακούντα· συνώνυμο παιδικός χώρος) ένα όργανο που αναπτύσσεται στην κοιλότητα της μήτρας κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και επικοινωνεί μεταξύ του σώματος της μητέρας και του εμβρύου. Πολύπλοκες βιολογικές διεργασίες συμβαίνουν στον πλακούντα, παρέχοντας... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Οπισθοπεριτοναϊκός χώρος (spatium retroperitoneale, συνώνυμο οπισθοπεριτοναϊκός χώρος) κυτταρικός χώρος που βρίσκεται μεταξύ του οπίσθιου τμήματος του βρεγματικού περιτοναίου και της ενδοκοιλιακής περιτονίας. εκτείνεται από το διάφραγμα μέχρι τη μικρή λεκάνη. ΣΕ … Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Μήτρα Η μήτρα (μήτρα, μέτρα) είναι ένα μη ζευγαρωμένο μυϊκό κοίλο όργανο στο οποίο εμφανίζεται η εμφύτευση και η ανάπτυξη του εμβρύου. που βρίσκεται στην πυελική κοιλότητα της γυναίκας. Οργανογένεση Μ. ανάπτυξη στην προγεννητική περίοδο ξεκινά όταν το μήκος του εμβρύου είναι περίπου 65 mm ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια

I Τα πτύελα (πτύελα) είναι μια παθολογικά αλλοιωμένη τραχειοβρογχική έκκριση που απελευθερώνεται κατά την απόχρεμψη με πρόσμιξη σάλιου και έκκρισης από τον ρινικό βλεννογόνο και τους παραρρίνιους κόλπους. Φυσιολογικά, η τραχειοβρογχική έκκριση αποτελείται από βλέννα,... ... Ιατρική εγκυκλοπαίδεια